产品介绍:

炭疽杆菌 (pagA/cap) 核酸检测试剂盒(荧光 PCR 法)是一种用于定性检测环境、临床或动物样本中是否存在炭疽杆菌(Bacillus anthracis)特异性核酸的分子生物学产品。该方法基于实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)技术,通过同步检测炭疽杆菌的毒力相关基因,为炭疽病的临床辅助诊断、动物疫病监测及环境生物安全检测提供准确、灵敏的实验室依据。
炭疽是一种由炭疽杆菌引起的人畜共患急性传染病,被世界卫生组织(WHO)和世界动物卫生组织(WOAH)列为重要报告疫病。该试剂盒通过检测pagA(保护性抗原基因)和cap(荚膜合成基因)两个关键靶标,不仅能确认炭疽杆菌的存在,还能辅助判断其毒力特征。
产品名称 | 炭疽杆菌 (pagA/cap) 核酸检测试剂盒(荧光 PCR 法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP4065 |
基本原理

该试剂盒的核心原理是多重实时荧光定量PCR(Multiplex qPCR),具体流程如下:
DNA提取:从待测样品(如血液、组织、拭子、土壤等)中提取总基因组DNA。
多重荧光PCR扩增:利用针对pagA基因(位于pXO1质粒)和cap基因(位于pXO2质粒)特异序列设计的引物和荧光标记的探针(如FAM/VIC标记),对提取的DNA进行同步扩增。
内标(IC)质控:为了确保检测结果的可靠性,试剂盒通常会包含一个内标(Internal Control)系统(如CY5标记)。内标会监控整个样本处理、核酸提取和PCR扩增过程,防止因操作失误或样本中存在抑制物导致的假阴性结果。
实时检测与判读:在扩增过程中,随着靶标DNA片段的指数级增加,对应的荧光信号也随之增强。仪器实时监测各通道(FAM、VIC、CY5)的荧光信号,根据扩增曲线和设定的阈值(Ct值)判定结果。
检测靶标与特异性

靶标基因:
pagA(保护性抗原基因):位于pXO1质粒上,是炭疽毒素的组成部分。该基因高度保守,是炭疽杆菌鉴定的核心靶标。
cap(荚膜合成基因):位于pXO2质粒上,负责编码荚膜。该基因的存在决定了细菌的侵袭力。
基因型判定:
野生毒株:通常表现为 pXO1+ (pagA阳性) 和 pXO2+ (cap阳性)。
疫苗株(如Sterne株):通常缺失pXO2质粒,表现为 pXO1+ (pagA阳性) 和 pXO2- (cap阴性)。
标本类型与处理
高特异性:该方法能特异性地检测炭疽杆菌,与近缘芽孢杆菌(如蜡样芽孢杆菌B. cereus、苏云金芽孢杆菌B. thuringiensis)无交叉反应,确保检测结果的准确性。
标本类型与处理
标本类型:
临床/动物样本:血液、皮肤水泡液、渗出物、咽拭子、粪便、脑脊液、组织(脾脏、淋巴结等)。
环境样本:土壤、皮毛、可疑粉末、污水等。
样本处理:
液体/拭子:直接提取DNA或离心后取沉淀提取。
组织:需研磨成匀浆后提取DNA。
注意:由于炭疽杆菌具有强致病性,样本处理必须在符合生物安全三级(BSL-3)或相应防护等级的实验室中进行。
应用价值

炭疽杆菌核酸检测在多个领域具有重要的应用价值:
临床辅助诊断:在患者出现皮肤炭疽(黑痂)、肺炭疽(高热、呼吸困难)或肠炭疽(剧烈腹痛)等疑似症状时,快速确诊病原体。
动物疫病监测:用于草食动物(牛、羊)突发死亡的病因排查,防止疫情在动物间传播。
环境与生物反恐:用于监测牧场、屠宰场、皮毛加工厂等环境的污染情况,以及应对可疑生物恐怖袭击事件。
疫苗株鉴别:通过检测cap基因的缺失情况,区分野生致病株与减毒疫苗株。
�� 优势与局限性

优势
高灵敏度:检测下限可低至 1×10³ copies/mL(或CFU/mL),能有效检出样品中微量的病原体DNA。
高特异性:多重PCR设计能有效区分炭疽杆菌与其近缘种,结果客观准确。
快速高效:整个PCR过程(不含DNA提取)通常在1.5-2小时内完成,远快于传统的细菌培养(需3-7天)。
双重验证:通过内标(IC)和双重靶标(pagA/cap)的设置,确保了结果的可靠性,避免了假阴性结果的产生。
局限性
无法区分死/活菌:检测出阳性仅表明样品中含有炭疽杆菌DNA,但无法确定病原体是否具有活性(活菌)。
生物安全要求极高:炭疽杆菌属于高致病性病原微生物,样本采集、运输、处理及检测必须严格遵守国家生物安全法律法规(如在BSL-3实验室操作)。
设备要求高:需要具备荧光定量PCR仪和专业的技术人员。
核心优势与技术要点:

高特异性
引物设计基于目标基因保守区域,可区分高度同源序列(如病毒变异株)。
高灵敏度
检测限低至10拷贝/反应,适用于微量样本。
高效扩增
热启动酶(如HotStarTaq)减少非特异性扩增,30分钟内完成40个循环。
防污染设计
UNG酶系统降解残留产物,避免交叉污染。
稳定性提升
冻干预混技术实现常温运输,操作便捷。
公司正在出售的产品:

信号转导和转录激活因子5b抗体 | Laminin subunit beta-1 层粘连蛋白β1抗体 |
FITC标记小鼠Ly-6A/E单克隆抗体 | 毒蕈碱型乙酰胆碱受体M4抗体 |
ZZZ3 锌指蛋白ZZZ3抗体 | DIAPH2 DIAPH2蛋白抗体 |
NYNRIN抗体 | 仓鼠白介素8(IL-8/CXCL8)核酸检测试剂盒 |
MSL1v1/CENP36 着丝粒蛋白36抗体 | 人蛋白磷酸酶2(2A),催化亚基,β亚型(PPP2CB)核酸检测试剂盒 |
phospho-PKC delta (Ser645) 磷酸化蛋白激酶C亚性D型抗体 | 大鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)PCR检测试剂盒 |
细胞生长调节核仁蛋白抗体 | 小鼠骨骼肌特异性受体酪氨酸激酶(MUSK)PCR检测试剂盒 |
SPATA3 精子生成相关蛋白3抗体 | 大鼠谷胱甘肽(GSH)PCR检测试剂盒 |
α-(1,3)-岩藻糖基转移酶 4 | 细胞核/浆蛋白抽提试剂盒 50T |
C7orf45 7号染色体开放阅读框45抗体 | 羟脯氨酸Hyp测试盒碱水解法 50管/48样 比色法 |
嗜酸性粒细胞阳离子型核糖核酸酶5抗体 | 小鼠血红素氧合酶2(HO2)PCR检测试剂盒 |
HPCAL4 海马钙蛋白样4多肽抗体 | 大鼠白介素1β前体(IL1B)PCR检测试剂盒 |
钠-糖共转运载体1抗体 | 人烯醇化酶(NSE)PCR检测试剂盒 |
小鼠内皮型一氧化氮合酶3(eNOS-3)PCR检测试剂盒 | 炭疽杆菌 (pagA/cap) 核酸检测试剂盒(荧光 PCR 法)猴脂联素(ADP)核酸检测试剂盒 |
大鼠钠/钾离子转运ATP酶α1肽(ATP1α1)PCR检测试剂盒 | 小鼠白介素13(IL-13)核酸检测试剂盒 |
人s可溶性CD14 sCD14PCR检测试剂盒 | 植物钙调素(CaM)核酸检测试剂盒 |
注意事项:

防污染操作
需在试剂准备区、样本处理区、扩增区独立操作,使用带滤芯吸头及专用实验服。
阳性对照管理
浓度高达1×10⁸拷贝/μL,需单独存放并避免污染其他试剂。
局限性
仅限科研使用,不可用于临床诊断;
环境样本中可能存在PCR抑制剂,需设置内参对照。
关键字: 炭疽杆菌 ;pagA/cap ;荧光PCR法;核酸检测试剂盒;
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