产品介绍:
该试剂盒采用双重TaqMan探针技术,可同时检测样本中鸭源性成分特异性基因和真核生物18S rRNA内参基因,实现对鸭成分的精准鉴别与检测过程质量监控,具有特异性强(≥99%)、灵敏度高(最低检测限可达0.1%鸭肉含量)的特点,适用于食品真实性鉴别、饲料安全检测及肉类掺假监控。
产品名称 | 鸭源性成分/内参基因(Duck/18S)/核酸检测试剂盒(双重荧光PCR法) | 货号 | AP3967 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
核心作用与检测原理
该试剂盒主要用于定性检测肉及加工品、内脏、动物饲料中鸭源性成分,同时通过内参基因监控检测质量:
鸭源性成分检测:靶向鸭特异性基因(如线粒体细胞色素b基因),探针标记FAM通道,特异性识别鸭DNA序列
内参基因检测:针对真核生物18S rRNA保守序列,探针标记HEX/VIC通道,用于监控样本DNA质量及PCR抑制物
技术优势:双重荧光PCR法可区分鸭与其他禽类(如鸡、鹅)的DNA,避免交叉反应16
二、产品性能与规格参数
性能指标 参数说明
检测方法 双重TaqMan荧光定量PCR法
规格 50T/盒(常见规格)
保存条件 -20℃保存,避免反复冻融
有效期 6-12个月(不同品牌有差异)
适用仪器 ABI系列、Bio-Rad系列、Roche LightCycler等主流荧光定量PCR仪
检测范围 2×10³-1×10⁸ copies/mL(不同品牌有差异)
最低检测限 1×10³ copies/mL(不同品牌有差异)或0.1%(W/W)鸭肉含量
特异性 ≥99%,与鸡、鹅等其他禽类无交叉反应
三、操作流程与结果判读
核心操作步骤
样本采集与处理:取肉及加工品、内脏或饲料样本,使用核酸提取试剂盒提取DNA
试剂配制:将反应液与核酸模板按比例混合(不同试剂盒的加样体系可能存在差异。例如,部分试剂盒体系为20μL,其中包含19μL反应液和1μL酶液;另一些试剂盒体系为25μL,其中包含20μL反应液和5μL模板。具体操作应以所使用试剂盒的说明书为准。)
扩增反应:运行双重荧光PCR程序,典型程序为:95℃预变性5-10分钟;然后进行40个循环的扩增,每个循环包含95℃ 15-30秒和60℃ 30-60秒25
结果判读标准
实验有效性:阴性对照无扩增曲线,阳性对照产生明显"S"型扩增曲线
鸭源性成分阳性:FAM通道Ct值≤35且呈"S"型扩增曲线
可疑结果:35<Ct值≤40,需复测确认
阴性结果:无Ct值或Ct值>40,无"S"型扩增曲线
四、应用场景与优势
主要应用场景
食品真实性鉴别:检测香肠、罐头等肉制品中是否掺入鸭源成分,防止"挂羊头卖狗肉"
饲料安全检测:监控禽类饲料中是否违规添加鸭源成分(如肉骨粉)
进出口检验检疫:为市场监管、进出口检验提供科学依据,确保动物源性产品合规性
科研与教学应用:为动物分子生物学、食品安全检测研究提供技术支持
与传统方法相比的优势
双重质量控制:内参基因监控确保结果可靠性,避免假阴性
高特异性与灵敏度:特异性≥99%,灵敏度可达0.1%的鸭肉掺假量
抗干扰能力强:结果不易受食品加工方式影响,可检测热处理肉制品
标准化程度高:基于ISO/TS 20224-10:2024和GB/T 38164-2019等标准
五、局限性与注意事项
无法区分物种亚型:该方法主要用于区分鸭与其他禽类(如鸡、鹅),但通常无法区分不同品种的家鸭(如北京鸭、绍兴鸭等)。若需进行更精细的品种鉴定,可能需要采用其他分子标记方法。
样本质量依赖:样本采集、运输和保存不当会导致DNA降解,影响检测结果
仅限科研用途:根据产品说明,该试剂盒仅可用于科研实验,不能直接用于临床诊断
需专业操作:要求严格分区操作,避免交叉污染
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注意事项
实验操作规范
严格分区操作:试剂配制区、样本处理区、扩增区需物理隔离,防止气溶胶污染。
每次实验需设置阴性对照(无模板DNA)、阳性对照(已知PAT基因样本)及空白对照(仅缓冲液)。
加样时避免过量或不足,推荐低容量反应管以提高热传导率。
污染防控
定期监测实验室空气、加样枪及仪器表面污染,可通过擦拭采样后扩增验证。
扩增产物需在专用区域处理,避免开盖时形成气溶胶污染。
关键字: 鸭源性成分/内参基因 ;Duck/18S/ ;核酸检测试剂盒;双重荧光PCR法;
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