操作要点：
电泳条件：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
转膜参数：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。
抗体选择：
一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。
二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。
显色方式：ECL化学发光法，预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。
产品概述：
Recombinant Human AMSH-LP（重组人AMSH-LP）是指在大肠杆菌（E. coli）中表达的、带有N端His标签的人源全长蛋白（氨基酸1-436），纯度>90%，经SDS-PAGE验证，用于相关泛素化调控机制的研究。
产品名称; Recombinant Human AMSH-LP
别名; ALMalpha, AMSH FP, AMSH LP, AMSH-like protease, AMSH-LP, AMSHFP, AMSHLP, Associated molecule with the SH3 domain of STAM (AMSH) like protein, FLJ31524, OTTHUMP00000020055, STALP_HUMAN, STAM binding protein like 1, STAM-binding protein-like 1, STAMBPL1
宿主; E.Coli
表达区间; 1-436
分子量; 47.9 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明：
复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液（pH 7.4）溶解冻干粉，轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测，作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释，避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜，遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理：
基因克隆：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。
蛋白纯化：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。
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重组蛋白生产流程：
通常包括以下几个核心步骤：
基因克隆：首先，科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列（目的基因）。
构建载体：将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中，这个载体就像是一个运输工具，
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主：将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中，这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养：宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养，其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息，开始大量生产目标蛋白。
纯化：通过一系列复杂的生物化学方法（如层析技术），将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来，以获得高纯度的产品。
关键字： AMSH-LP;47.9 kDa; 1-436;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域，利用互联网、数据分析及自动化技术，包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品，截止至2024年5月，西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景，西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力，更加重视本土化，建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活，能快速响应客户需求的产品。