操作要点:

电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
产品概述:

Recombinant Human CAMKIV 是一种在真核或原核系统中表达的、带有标签的人源全长重组蛋白,作为钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶亚家族成员,主要用于研究神经元基因表达调控、T细胞活化及钙信号转导通路。
产品名称; Recombinant Human CAMKIV
别名; Brain Ca(2+) calmodulin dependent protein kinase type 4, Brain Ca(2+) calmodulin dependent protein kinase type IV, Brain Ca++-calmodulin dependent protein kinase type IV, Calcium / calmodulin dependent protein kinase type 4 catalytic chain, Calcium / calmodulin dependent protein kinase type IV catalytic chain, Calcium/calmodulin dependent protein kinase IV
宿主; E.Coli
表达区间; 1-473
分子量; 51.9 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明:

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品:

宫颈癌抑癌蛋白5/锌指蛋白434抗体 | RAB样蛋白4抗体 |
紫外切除修复蛋白RAD23B抗体 | Cy3标记的网格蛋白重链抗体 |
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶ICK抗体 | ?羟脯(HYP)终点比色法定量检测试剂盒 |
磷酸化DNA损伤关键蛋白Mre11抗体 | 组织前列腺型酸性磷酸酶(PACP)活性比色法定量检测试剂盒 |
细胞甘油二脂酰激酶(DAG KINASE)酶连续循环比色法定量检测试剂盒 | 石蜡切片组织PAR-1蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
动物组织V型ATP酶(V type ATPase )活性比色法定量检测试剂盒 | 石蜡切片胆色素霍尔(Hall)染色试剂盒 |
动物组织肌质网横小管(T Tube)分离试剂盒 | Wnt1信号通路蛋白3抗体 |
抗体/蛋白HRP标记制备试剂盒 | KIAA1737蛋白抗体 |
毛发砷元素比色法定量检测试剂盒 | FBXO10蛋白抗体 |
体液牛病毒性腹泻病毒II型(Bovine Viral Diarrhoea Virus -2;BVDV-2)定性基因检测试剂盒 | 凝血因子12轻链抗体 |
噬菌体溶菌斑点免疫杂交筛选试剂盒 | 蛋白O岩藻糖基转移酶2抗体 |
细胞GSK-3ALPHA蛋白表达荧光定量检测试剂盒 | Recombinant Human CAMKIV盐皮质激素受体抗体 |
甲硝唑抗体 | Alexa Fluor® 700标记人CD56 (NCAM)单克隆抗体 |
重组蛋白生产流程:

通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
关键字: CAMKIV;51.9 kDa; 1-473;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。