重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
Recombinant Human Carbonic Anhydrase 1 (CA1) 是一种在大肠杆菌或酵母中重组表达的人源碳酸酐酶,作为催化二氧化碳可逆水合反应的关键酶,主要用于科研以研究其在红细胞呼吸功能、酸碱平衡调节及自身免疫疾病中的生物学机制。
产品名 | Recombinant Human Carbonic Anhydrase 1 | 分子量 | 28.6 kDa |
表达区间 | 1-261 | 货号 | XG-DB1449 |
别名
CA 1, CA I, CA-I, CA1, CAB, CAH1_HUMAN, CAI, CAN, Car 1, Car1, Carbonate dehydratase I, Carbonic anhydrase 1, Carbonic anhydrase A, Carbonic anhydrase B, Carbonic anhydrase B, formerly, Carbonic anhydrase I, Carbonic dehydratase, ECK0125, JW0122, yadF
宿主; E.Coli
表达区间; 1-261
分子量; 28.6 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
高迁移率族蛋白N4抗体 | PRRC2B蛋白抗体 |
转录因子3抗体 | AF680标记的运动神经元及胰腺同源蛋白1抗体 |
退行性精母细胞同源物1抗体 | 磷脂酰乙醇胺PE(phosphatidylethanolamine)高效液相色谱法定量检测试剂盒 |
磷酸化DNA依赖性蛋白激酶抗体 | 血液α-L-岩藻糖苷酶(AFU)比色法定量检测试剂盒 |
体液基质金属(MMP-9)明胶法比色定量检测试剂盒 | PAR-1蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 |
细胞磷酸二酯酶4(PDE4)活性荧光定量检测试剂盒 | 全组织氧化酶活性染色试剂盒 |
BrdU标记法组织石蜡切片细胞繁殖NBT显色检测试剂盒 | Smad蛋白相互作用蛋白1抗体 |
SULFORHODAMINE蛋白标记试剂盒 | KIAA1881蛋白抗体 |
水质砷元素比色法定量检测试剂盒 | DNA聚合酶δ相互作用蛋白3抗体 |
食物阿斯巴塘(aspartame)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 | 磷酸化自噬相关蛋白3抗体 |
HVA高效液相色谱电化学定量检测试剂盒 | 蛋白磷酸酶2调节亚基5E抗体 |
细胞ERK蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 | Recombinant Human Carbonic Anhydrase 1有丝分裂蛋白BUB3抗体 |
肌萎缩侧索硬化症相关蛋白HECW1抗体 | AF700标记人CD25单克隆抗体 |
关键字: Carbonic Anhydrase 1;28.6 kDa; 1-261;
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