大鼠腹膜间皮细胞

细胞简介：

大鼠腹膜间皮细胞分离自腹膜组织；腹膜是存在于高等脊椎动物腹腔中的一层黏膜，主要由间皮细胞构成，藉由结缔组织的支持所形成的一层膜状组织。腹膜包覆大部分腹腔内的器官，能分泌黏液润湿脏器的表面，减轻脏器间的摩擦。腹腔脏器的血液、淋巴和神经组织经由腹膜与外界相连；腹膜也具有吸收撞击保护内脏的效果。腹膜(peritoneum)为全身面积最大、配布最复杂的浆膜，由皮及少量结缔组织构成，薄而光滑，呈半透明状。衬于腹、盆腔壁内表面的腹膜称为壁腹膜(parietal-peritoneum)或腹壁薄层；覆盖腹、盆腔器表面的部分称为脏腹膜(visceral-peritoneum)腹膜或腹膜脏层。脏腹膜与壁腹膜互相延续、移行，共同围成不规则的潜在性腔隙，称为腹膜腔(peritoneal-cavity)。腹膜腔是脏、壁两层腹膜之间相互移行围成的潜在性间隙。腹膜腔内有少量浆液，在脏器活动时可减少摩擦。腹膜间皮细胞属于上皮组织中的单层扁平上皮，是覆盖于腹膜表面的一层细胞。间皮细胞是构成间皮的细胞，正常大小约为15-25微米，细胞常呈圆形或者卵圆形。其功用是提供润滑，使器官与器官、器官与胸膜与腹膜间都能得到良好的保护，不会互相磨损受伤。而间皮所生产的润滑和保护作用就是靠间皮细胞所分泌的物质来达成，分泌物多半为细胞外基质、玻尿酸类物质。

产品信息：

方法简介：实验室分离的大鼠腹膜间皮细胞采用混合胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的大鼠腹膜间皮细胞经PCK或Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

产品名称：大鼠腹膜间皮细胞

英文简称：PMCs

组织来源：腹膜组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养信息：包被条件PLL(0.1mg/ml)

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%胰蛋白酶大鼠腹膜间皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞实验要点：

一、取材与分离

新鲜、无菌：组织离体越快越好，全程冰上操作。

去除杂质：剔除脂肪、结缔组织、血污，减少污染和消化干扰。

温和消化：

控制酶浓度、温度、时间

及时终止消化，避免细胞过度损伤

过筛过滤：去除组织块，获得单细胞悬液。

二、接种与培养

密度关键：原代细胞普遍怕稀，密度太低不贴壁、不长。

完全贴壁后再换液：刚接种别乱动。

专用培养基：

内皮、上皮、平滑肌、神经元等尽量用专用原代培养基

血清质量影响极大，建议批次验证

CO₂、湿度、温度严格稳定，避免频繁开关门。

三、传代与冻存

不要等太满：汇合度 70%–80% 就传，不要等到堆积。

消化监控：镜下观察细胞变圆、间隙变大立即终止。

冻存保护：

标准：90% 血清 + 10% DMSO

程序降温，尽快转入液氮

原代细胞冻存复苏能力弱，尽量早冻、多冻。

四、污染与状态判断

一旦浑浊、pH 骤变、有颗粒：直接丢弃，不要救。

细胞状态好：

形态均一、轮廓清晰

生长均匀、无局部堆积

出现分化、拉长、多核、空泡多：说明老化 / 状态差，不建议继续实验。
冻存复苏：

冻存的梯度降温：

逐步降温：细胞冻存时，先在4℃放置30分钟，再在-20℃放置1小时，随后转移至-80℃冰箱过夜，最后放入液氮长期保存，避免温度骤变导致细胞内冰晶形成。

标记清晰：冻存管上需标记细胞名称、代次、冻存日期和操作者姓名，避免后续复苏时混淆。

复苏的快速操作：

解冻后立即离心：细胞解冻后迅速转移至含预热培养基的离心管中，离心去除含DMSO的冻存液，减少DMSO对细胞的毒性。

复苏后静置培养：复苏后的细胞接种后，24小时内不要换液，让细胞有足够的时间恢复状态，24小时后再更换新鲜培养基。

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