人肝动脉平滑肌细胞
产品信息:
产品名称 人肝动脉平滑肌细胞
组织来源 肝动脉组织
种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Human Hepatic Artery Smooth Muscle Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 | 货号 | P-X1279 |
培养信息:
方法简介:实验室分离的人肝动脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的人肝动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:人肝动脉平滑肌细胞
组织来源:肝动脉组织
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液:0.25%胰蛋白酶人肝动脉平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 :
人肝动脉平滑肌细胞分离自肝动脉组织;在胚胎期,肝脏有3条动脉供血,分别来源于胃左动脉、腹腔动脉和肠系膜上动脉,这3条动脉分别供应肝脏的不同部位。出生后,一般保留一条动脉,大部分为起源于腹腔动脉的动脉,由其分出左、右肝动脉供应左、右半肝。偶尔也可见起源于胃左动脉的动脉或起源于肠系膜上动脉的动脉。但也有2条动脉并存的情况,如起源于腹腔动脉和起源于胃左动脉(25%),起源于腹腔动脉和起源于肠系腊上动脉(10%),而起源于胃左动脉和起源于肠系膜上动脉的2条动脉同时存在的情况比较少见。此外,还有5%像胚胎期一样,3条动脉同时存在。这种起源于腹腔动脉以外的肝动脉称为迷走肝动脉,如果肝脏没有起源于腹腔动脉的动脉供血时,此种异位起源的肝动脉称替代动脉,如果在常见肝动脉类型外,还有一支这种异位起始的动脉供应肝脏的一部分血流,这种肝动脉称副肝动脉。肝动脉平滑肌细胞是肝动脉的重要结构细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。肝动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态:大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。血管平滑肌细胞的加速生长潜能是血管疾病进展的关键因素,最新研究表明血管平滑肌细胞表达的ICAM-1和VCAM-1能促进血管壁的炎症反应,并且与血管疾病的发展及稳定性有关。
原代细胞实验要点:
一、取材与分离
新鲜、无菌:组织离体越快越好,全程冰上操作。
去除杂质:剔除脂肪、结缔组织、血污,减少污染和消化干扰。
温和消化:
控制酶浓度、温度、时间
及时终止消化,避免细胞过度损伤
过筛过滤:去除组织块,获得单细胞悬液。
二、接种与培养
密度关键:原代细胞普遍怕稀,密度太低不贴壁、不长。
完全贴壁后再换液:刚接种别乱动。
专用培养基:
内皮、上皮、平滑肌、神经元等尽量用专用原代培养基
血清质量影响极大,建议批次验证
CO₂、湿度、温度严格稳定,避免频繁开关门。
三、传代与冻存
不要等太满:汇合度 70%–80% 就传,不要等到堆积。
消化监控:镜下观察细胞变圆、间隙变大立即终止。
冻存保护:
标准:90% 血清 + 10% DMSO
程序降温,尽快转入液氮
原代细胞冻存复苏能力弱,尽量早冻、多冻。
四、污染与状态判断
一旦浑浊、pH 骤变、有颗粒:直接丢弃,不要救。
细胞状态好:
形态均一、轮廓清晰
生长均匀、无局部堆积
出现分化、拉长、多核、空泡多:说明老化 / 状态差,不建议继续实验。
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实验后处理:
废弃样本处理:
细胞废弃物消毒:实验后的培养基、细胞悬液需用含有效氯的消毒液处理30分钟后再排放,培养瓶、吸管等耗材需高压灭菌后丢弃。
动物组织处理:剩余的动物组织需放入专用的生物危害垃圾袋,由专业机构进行无害化处理,避免生物污染。
实验设备清洁:
超净工作台清洁:实验结束后用75%酒精擦拭台面,打开紫外灯照射30分钟,关闭风机。
培养箱定期清洁:每周用75%酒精擦拭培养箱内壁和隔板,每2周更换一次培养箱内的水盘,避免滋生细菌。
关键字: 人肝动脉平滑肌细胞;成纤维细胞样; 贴壁;
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