人脉络膜微血管内皮细胞
产品信息：
产品名称 人脉络膜微血管内皮细胞
组织来源 脉络膜组织
种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Human Choroidal Microvascular Endothelial Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 内皮细胞样 | 货号 | P-X1472 |
培养信息：
方法简介：实验室分离的人脉络膜微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测：实验室分离的人脉络膜微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称：人脉络膜微血管内皮细胞
英文简称：CMVECs,CMVECs
组织来源：脉络膜组织
产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息：包被条件PLL（0.1mg/ml）或明胶（0.1%）
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：内皮细胞样
传代特性：可传2-3代
消化液：0.25%胰蛋白酶人脉络膜微血管内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 ：
人脉络膜微血管内皮细胞分离自眼球脉络膜组织；脉络膜在视网膜和巩膜之间，含有丰富血管和色素细胞，对外力冲击的耐受性较视网膜差，当眼球受到从前面来的外力的冲击作用通过玻璃体传到后极部时，坚硬的巩膜在其外面又有抵抗作用，使脉络膜在内外两种作用夹攻下而发生破裂和出血。脉络膜呈暗褐色，围绕视神经乳头部有照膜，为青绿色带金属光泽的三角形区。脉络膜是眼球中膜的后2/3处的薄膜，由纤维组织、小血管和毛细血管组成，软而薄，棕红色，在巩膜和视网膜之间，续连于睫状体后方。脉络膜的血循环营养视网膜外层，其含有的丰富色素起遮光暗房作用。主要功能是营养视网膜外层及玻璃体，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同时对视觉系统起保护作用，对整个视觉神经有调节作用。续连于睫状体后方，含丰富的血管和色素细胞，有营养和遮光作用。
原代细胞分离：
组织取材
无菌操作是底线：取材前对动物/组织进行严格消毒，全程在超净台内操作，所有工具提前灭菌
新鲜度决定活性：取材后立即放入预冷的含双抗的PBS中，30分钟内完成分离，若无法即时处理，可暂存于4℃冰箱（不超过24小时）
精准取材：避开血管、脂肪、结缔组织等非目标组织，比如分离肝细胞时要剔除胆囊，分离神经细胞时要去除脑膜
组织处理
机械法：通过剪碎、研磨、过滤等方式分散组织，适用于结缔组织较少的组织（如肝脏、肾脏），注意力度适中，避免过度研磨损伤细胞
酶解法：根据组织类型选择合适的酶：
胰蛋白酶：适用于消化上皮组织、肝、肾等，浓度0.25%-0.5%，消化时间15-30分钟，37℃
胶原酶：适用于消化结缔组织、脂肪组织、肌肉组织等，浓度0.1%-0.3%，消化时间1-4小时，37℃，可加入EDTA增强效果
透明质酸酶：常与胶原酶联用，消化软骨、滑膜等富含透明质酸的组织
联合法：机械剪碎后再进行酶解，兼顾效率与细胞活性
细胞筛选与纯化
过滤：使用200-400目细胞筛过滤细胞悬液，去除未消化的组织块
离心：800-1200RPM离心5-8分钟，弃上清后用PBS重洗2-3次，去除细胞碎片和酶液
特异性纯化：使用差速贴壁法（利用不同细胞贴壁速度差异）、密度梯度离心法（如Percoll、Ficoll）、免疫磁珠分选或流式细胞术，获得高纯度目标细胞
公司正在出售的产品：
人脑瘤细胞；SF763 | 结核分支杆菌PCR检测试剂盒 |
人脑瘤细胞；SF767 | 解脲脲原体PCR检测试剂盒 |
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原代细胞实验注意事项：
取材要快、要新鲜、全程无菌
组织离体时间越短越好，冰上操作，减少缺血损伤。
严格控制细胞代数
原代细胞只建议用 P0～P3，代数越高越容易分化、结果越不可靠。
接种密度宁高不低
原代细胞普遍怕稀，太稀不贴壁、不生长、容易凋亡。
消化是关键，宁轻勿重
胰酶 / 胶原酶只消化到细胞变圆就终止，过度消化必死一批。
吹打轻柔，避免机械损伤。
培养基和血清不要随便换批次
血清、基础培养基、添加因子固定厂家固定批次，换批次必须先预实验。
避免频繁折腾细胞
少开培养箱门，不反复观察、不反复拿进拿出，温度、pH 波动对原代杀伤极大。
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