产品介绍:
产品性质与用途
检测目标:该试剂盒专门用于检测水稻内源基因(如SPS基因、Stn基因或tRNALeu基因等)。
应用领域:主要用于转基因水稻筛查的参照基因(内标),或用于食品中水稻源性成分的鉴定(如检测米粉、米制品、饲料中是否含有水稻成分,防止掺假或进行物种鉴定)。
产品名称 | 水稻內源基因核酸检测试剂盒(恒温荧光法) | 货号 | AP3389 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 48T |
技术原理:采用恒温荧光法(通常为LAMP技术)。
优势:相比传统PCR,该方法无需反复升降温,反应在恒定温度(如60-65℃)下进行,具有速度快(通常30-60分钟)、灵敏度高(可检出低含量DNA)、操作简便(对仪器要求低,可肉眼观察结果)的特点。
2. 操作流程与关键参数
根据同类产品的说明书,操作通常包括以下步骤:
步骤 操作内容 注意事项
1. 样本制备 从稻米、米粉、饲料或植物组织中提取基因组DNA。 必须使用专用的DNA提取试剂盒,且需防止交叉污染。
2. 试剂配制 将反应液(含引物、酶、dNTPs等)分装至PCR管中。 需在冰上操作,避光保存反应液。
3. 加样 向反应管中加入提取的DNA模板。 建议设置阴性对照(无菌水)和阳性对照。
4. 扩增 将反应管放入恒温荧光检测仪(如Genie系列)或荧光定量PCR仪中。 反应温度通常设定在 60-65℃,反应时间约 40-60分钟。
5. 结果判读 观察荧光扩增曲线或终点荧光值。 若出现典型的“S”型扩增曲线或终点荧光值显著升高,则判定为阳性。
注意事项
防污染:由于灵敏度极高,实验必须严格分区(试剂准备区、样本制备区、扩增区),使用带滤芯的吸头,实验结束后用次氯酸钠或酒精清洁台面。
保存条件:试剂盒通常需要在 -20℃ 条件下保存,避免反复冻融。
适用性:该试剂盒不仅适用于纯水稻样本,也适用于复杂的加工食品(如罐头、膨化食品)和饲料中水稻DNA的检测。
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注意事项
实验操作规范
严格分区操作:试剂配制区、样本处理区、扩增区需物理隔离,防止气溶胶污染。
每次实验需设置阴性对照(无模板DNA)、阳性对照(已知PAT基因样本)及空白对照(仅缓冲液)。
加样时避免过量或不足,推荐低容量反应管以提高热传导率。
污染防控
定期监测实验室空气、加样枪及仪器表面污染,可通过擦拭采样后扩增验证。
扩增产物需在专用区域处理,避免开盖时形成气溶胶污染。
关键字: 水稻;內源基因 ;恒温荧光法;核酸检测试剂盒;
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