产品介绍:
检测原理与目的
检测原理:基于实时荧光定量PCR(qPCR)技术。试剂盒中包含一对特异性引物和一条特异性的TaqMan荧光探针。在PCR扩增过程中,随着目标DNA片段的指数级扩增,探针被Taq酶切断,释放出荧光信号。仪器实时监测荧光信号的累积,通过Ct值(循环阈值)来判断样本中是否含有目标基因,并可进行定量分析。
产品名称 | tNOS基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) | 货号 | AP3398 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 48T |
核心目的:用于食品、饲料、农作物植株等样品中tNOS基因的高特异性检测和定量分析。
应用场景:广泛应用于食品安全监管(如标识转基因成分)、海关出入境检验检疫、农业转基因生物安全评价以及相关科研领域。
�� 产品核心参数与组成
项目 详细信息
检测方法 实时荧光定量PCR (TaqMan探针法)
检测靶标 胭脂碱合成酶终止子 (tNOS)
产品规格 48T 或 48T (即48/50次测试)
检测限 最低检测限可达 1×10³ copies/mL (部分产品可达10拷贝/反应)
主要组分 tNOS反应液 (含引物、探针、dNTPs、缓冲液)、酶混合液 (Taq酶等)、
阳性质控品 (含tNOS序列的DNA片段)、阴性质控品 (无菌水)
��️ 操作流程
该试剂盒的操作流程遵循标准的qPCR流程:
样本处理:提取待测样本(如植物叶片、食品、饲料等)的基因组DNA。
试剂准备:在冰上将反应液和酶液按说明书比例混合,配制成预混液。
加样:将配制好的预混液分装到PCR管/板中,然后加入DNA模板,同时设置阳性和阴性对照。
荧光PCR扩增:将反应体系放入荧光定量PCR仪中,设置反应程序(通常为95℃预变性,然后进行40个左右的扩增循环)。
结果分析:仪器自动根据荧光信号和Ct值判断结果。
�� 结果判读标准
结果判读主要依据扩增曲线和Ct值:
结果类型 判读标准 解释
阳性 (+) 扩增曲线呈典型的“S”型,且 Ct值 ≤ 35-40 (依说明书阈值而定)。 样品中检测到tNOS基因片段,判定为转基因阳性。
阴性 (-) 无Ct值,或Ct值 > 阈值,且无典型扩增曲线。 样品中未检测到tNOS基因片段,判定为阴性。
无效 阳性对照未出现扩增曲线,或阴性对照出现扩增曲线。 实验结果无效,需排查污染或试剂失效问题后重新检测。
⚠️ 注意事项
防止污染:qPCR灵敏度极高,极易受气溶胶污染影响。建议实验分区操作(试剂准备区、样本制备区、扩增区),并使用带滤芯的枪头。
避光保存:反应液中的荧光探针成分对光敏感,试剂应避光保存,使用前避免长时间暴露在强光下。
仪器兼容性:适用于主流的实时荧光定量PCR仪(如ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche 480等)。
对照设置:每次检测必须严格设置阳性和阴性对照,以确保实验结果的准确性和可靠性。
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应用场景与产品选择建议
科研领域:
常规PCR试剂盒。
临床诊断:
探针法qPCR试剂盒(如牛白血病病毒,灵敏度100拷贝/反应)。
现场检测:
恒温扩增试剂盒(如LAMP法,90分钟出结果)
关键字: tNOS;基因 ;核酸检测试剂盒;PCR-荧光探针法;
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