重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
Pol κ 在基因组维护中扮演着“损伤跨越专家”的角色,是跨损伤合成(Translesion Synthesis, TLS)通路的核心执行者。它能够在 DNA 模板受损(如紫外线引起的光产物、氧化损伤)而常规复制聚合酶停滞时,直接复制过损伤部位,避免复制叉崩溃。由于其独特的底物特异性,它已成为研究 DNA 损伤耐受机制和肿瘤耐药性的关键工具。
产品名 | Recombinant Human DNA Polymerase Kappa | 分子量 | 61.5 kDa |
表达区间 | 1-560 | 货号 | XG-DB1784 |
别名
DinB homolog 1 (E. coli), DINB protein, DINB1, DINP, DNA damage inducible protein b, DNA polymerase kappa, Polk, POLK_HUMAN, POLQ, Polymerase (DNA directed) kappa, polymerase, DNA, kappa
宿主; E.Coli
表达区间; 1-560
分子量; 61.5 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
过量位点蛋白5抗体 | RAN结合蛋白6抗体 |
肿瘤蛋白p53诱导蛋白13(肿瘤抑制基因) | 10号染色体开放阅读框62抗体 |
四分子交联体13抗体(四旋蛋白) | 血液总酶连续循环比色法定量检测试剂盒 |
磷酸化富亮氨酸重复激酶2抗体 | 人转铁蛋白标准溶液 |
组织对氧磷酶1(PON1)内酯酶活性比色法定量检测试剂盒 | 蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 |
细胞脂酰脱氢酶(ACYL COA DEHYDROGENASE)总活性比色法定量检测试剂盒 | 冰冻切片结缔组织(CONNECTIVE TISSUE)马森(MASSON) |
多参数细胞周期全周期流式细胞分析试剂盒 | TRIM45蛋白抗体 |
微型RNA(miRNA)同位素探针制备试剂盒 | G蛋白偶联受体34抗体 |
植物蔗糖磷酸合成酶(sucrose phosphate synthase)活性 | FITC标记人CD62P单克隆抗体 |
细胞抗坏血酸比色法定量检测试剂盒 | 鸟苷酸转换因子VAV1抗体 |
细菌革兰氏(GRAM)染色试剂盒 | 大肠杆菌志贺样毒素Ⅱ型突变体(O139菌型)抗体 |
载玻片细胞IP3R受体蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 | Recombinant Human DNA Polymerase Kappa原钙粘蛋白γA9抗体 |
减数分裂阻滞蛋白1抗体 | 8号染色体开放阅读框84抗体 |
关键字: DNA Polymerase Kappa;61.5 kDa; 1-560;
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