细胞简介:

人羊膜间充质干分离自胎盘羊膜组织;胎盘(placenta)是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官,由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育,依靠胎盘从母体取得营养,而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素,是一个重要的内分泌器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代,胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合,以达到母子间物质的交换,这样的结构称假胎盘。羊膜是胎盘的内层,与眼结膜组织结构相似,含有眼表上皮细胞,包括结膜细胞和角膜上皮细胞生长所需要的物质,其光滑,无血管、神经及淋巴,具有一定的弹性;在电镜下,其分为五层:上皮层、基底膜、致密层、纤维母细胞层和海绵层,羊膜基底膜和羊膜羊膜基质层含有大量不同的胶元,主要为Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型胶原和纤维粘连蛋白、层粘连蛋白等成份。羊膜细胞主要由羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞组成,均具有多分化潜能,可转化为神经元,且还有合成、释放生物活性物质和神经营养因子的功能。
产品名称 | 人羊膜间充质干细胞 | 组织来源 | 羊膜 |
英文名称 | Human Amniotic Mesenchymal Stem Cells | 产品规格 | 5×10^5Cells/T25 |
货号 | XG-X4707 | 生长特性 | 贴壁 |

产品信息:

产品名称 人羊膜间充质干细胞
组织来源 羊膜
默认种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
方法简介 实验室分离的人羊膜间充质干采用 - 胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测 实验室分离的人羊膜间充质干经CD44免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传3-5代左右;3代以内状态佳
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
人羊膜间充质干细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养步骤:

1. 细胞复苏
运输与接收:细胞以液氮冻存形式运输,收到后立即用75%酒精喷洒消毒细胞瓶,置于超净台内无菌操作。
复苏操作:将细胞瓶放入37℃、5% CO培养箱中静置3-4小时稳定状态,显微镜下观察细胞形态和密度,记录初始状态(建议40x、100x、200x各拍一张照片)。
2. 细胞传代
传代时机:当细胞密度达80%汇合度时进行传代。
操作步骤:
弃去旧培养基,用无钙镁PBS润洗细胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶消化液(1-2 mL),37℃孵育1-2分钟,显微镜下观察细胞变圆脱落。
加入5 mL完全培养基终止消化,轻轻吹打使细胞完全脱落。
离心(1000 RPM,5分钟),弃上清,用1-2 mL培养基重悬。
按1:2比例分瓶传代(如T25瓶分至两个T25瓶),补充新鲜培养基至5 mL。
换液频率:每2-3天换液一次。
3. 细胞冻存
冻存液:使用无血清冻存液。
冻存步骤:细胞传代后,用胰蛋白酶消化并离心,重悬于冻存液,缓慢降温至-80℃,最终转入液氮长期保存。
公司正在出售的产品:
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产品注意事项:
无菌操作是生命线:所有操作必须在生物安全柜内严格无菌进行,使用专用试剂和耗材,防止交叉污染。
消化是关键步骤:
控制时间:使用胰蛋白酶或TrypLE Express消化时,严格控制在1-2分钟内。显微镜下观察到细胞变圆、边缘松动即可终止,避免过度消化导致细胞损伤。
消化液选择:部分供应商推荐使用0.25%胰蛋白酶,也有使用TrypLE Express或0.25% EDTA胰酶的,可根据实验室条件和细胞反应选择。
培养基与生长因子:
基础培养基:推荐使用专用培养基(如EGM-2 MV BulletKit)。若使用DMEM/F12等基础培养基,需补充10-20%胎牛血清(FBS)及抗生素(如青霉素/链霉素)。
生长因子:为促进生长,可添加VEGF、FGF等内皮细胞生长因子。传代后可尝试对比培养(一瓶用原装完全培养基,一瓶用自配培养基)。
细胞密度与传代:
最佳传代密度:建议在细胞汇合度达70%-80%时进行传代,避免过度生长导致细胞状态下降。
生长不均处理:若细胞生长不均,成岛状分布,可将细胞消化后重新打散,加入新鲜培养基培养]^。
污染监测与处理:
定期检查:定期观察细胞有无支原体、细菌等污染迹象。
污染处理:若发现污染,需根据污染程度决定。轻度污染可尝试用含高浓度抗生素的培养液反复清洗,但严重污染时建议弃置细胞。
关键字: 人羊膜间充质;干细胞;
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