大鼠冠状动脉内皮细胞 新品

细胞简介：

大鼠冠状动脉内皮分离自冠状动脉组织；冠状动脉是供给心脏血液的动脉，起于主动脉根部，分左右两支，行于心脏表面。采用Schlesinger等的分类原则，将冠状动脉的分布分为三型：右优势型、均衡型、左优势型。左右冠状动脉是升主动脉的对分支。左冠状动脉为一短干，发自左主动脉窦，经肺动脉起始部和左心耳之间，沿冠状沟向左前方行后，立即分为前室间支和旋支。前室间支沿前室间沟下行，旋支绕过心尖切迹至心的膈面与右冠状动脉的后室间支相吻合。冠状动脉内皮细胞呈单层扁平分布，是一薄层的专门上皮细胞，它形成冠状动脉的内壁，是血管管腔内血液及其他血管壁（单层鳞状上皮）的接口。内皮细胞是沿着整个循环系统，由心脏直至小的微血管。

产品信息:

产品名称 大鼠冠状动脉内皮细胞

组织来源 冠状动脉

默认种属 大鼠

产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介 公司实验室分离的大鼠冠状动脉内皮采用混合酶短暂消化后组织贴块、结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测 公司实验室分离的大鼠冠状动脉内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠冠状动脉内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

细胞培养步骤：

组织块培养法

取材与剪切

在无菌条件下取出组织，用Hanks液或PBS清洗，去除血污和脂肪、结缔组织等非目标成分。

用眼科剪将组织剪切成 0.5-1 mm³ 的小块。

接种

用吸管将组织块均匀地贴附在培养皿或培养瓶的内表面，各组织块之间保持一定间距（约0.5 cm）。

吸去多余液体，将培养器皿翻转，放入 37℃、5% CO₂ 的培养箱中，静置 1-3小时，让组织块牢固贴壁。

加液培养

待组织块贴壁后，轻轻翻转培养瓶，从一侧缓慢加入足量的培养液，使组织块浸没在液体中，注意不要让液体直接冲击组织块，以免冲起。

继续在培养箱中静置培养。通常 3-5天 后可观察到细胞从组织块边缘长出。

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无菌操作是生命线：所有操作必须在生物安全柜内严格无菌进行，使用专用试剂和耗材，防止交叉污染。

消化是关键步骤：

控制时间：使用胰蛋白酶或TrypLE Express消化时，严格控制在1-2分钟内。显微镜下观察到细胞变圆、边缘松动即可终止，避免过度消化导致细胞损伤。

消化液选择：部分供应商推荐使用0.25%胰蛋白酶，也有使用TrypLE Express或0.25% EDTA胰酶的，可根据实验室条件和细胞反应选择。

培养基与生长因子：

基础培养基：推荐使用专用培养基（如EGM-2 MV BulletKit）。若使用DMEM/F12等基础培养基，需补充10-20%胎牛血清（FBS）及抗生素（如青霉素/链霉素）。

生长因子：为促进生长，可添加VEGF、FGF等内皮细胞生长因子。传代后可尝试对比培养（一瓶用原装完全培养基，一瓶用自配培养基）。

细胞密度与传代：

最佳传代密度：建议在细胞汇合度达70%-80%时进行传代，避免过度生长导致细胞状态下降。

生长不均处理：若细胞生长不均，成岛状分布，可将细胞消化后重新打散，加入新鲜培养基培养]^。

污染监测与处理：

定期检查：定期观察细胞有无支原体、细菌等污染迹象。

污染处理：若发现污染，需根据污染程度决定。轻度污染可尝试用含高浓度抗生素的培养液反复清洗，但严重污染时建议弃置细胞。