产品介绍:
副流感病毒Ⅲ型(HPIV-3)核酸检测试剂盒是一种用于体外定性检测人副流感病毒Ⅲ型核酸的分子诊断产品。该试剂盒通常基于实时荧光RT-PCR(逆转录-聚合酶链式反应)技术,能够快速、特异地识别临床样本中是否存在副流感病毒Ⅲ型的RNA。
产品名称 | 副流感病毒Ⅲ型核酸检测试剂盒 |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3061 |
检测原理
该试剂盒的核心原理是一步法实时荧光RT-PCR(TaqMan探针法)。
逆转录(RT):首先利用逆转录酶将样本中提取的病毒RNA反转录成互补DNA(cDNA)。
PCR扩增:针对副流感病毒Ⅲ型的特异性基因序列(通常是血凝素-神经氨酸酶基因 HN 或核衣壳蛋白基因 NP)设计特异性的引物和探针。
荧光检测:在PCR扩增过程中,随着目标DNA片段的指数级扩增,标记在探针上的荧光基团被释放,仪器实时监测荧光信号。若样本中存在副流感病毒Ⅲ型核酸,则会观察到特定的荧光增长曲线。
核心组成
试剂盒通常包含以下关键组分:
PCR反应液:含反应缓冲液、dNTPs、特异性引物和TaqMan荧光探针(通常标记FAM荧光素)。
酶混合液:含逆转录酶和热启动Taq DNA聚合酶。
阳性对照:含有副流感病毒Ⅲ型目标基因片段的质粒或灭活病毒,用于验证试剂盒的有效性。
阴性对照:无核酸酶的水,用于监控是否存在污染。
内标(部分试剂盒包含):用于监控样本采集、提取及扩增过程是否正常,防止假阴性。
适用样本与操作流程
适用样本类型:
呼吸道样本:咽拭子、鼻咽拭子、鼻咽吸取物、痰液、肺泡灌洗液等。
标准操作流程:
样本采集:使用专用采样拭子采集患者鼻咽部分泌物。
病毒RNA提取:使用病毒RNA提取试剂盒从样本中提取总RNA。
体系配置:将提取的RNA、PCR反应液和酶液按比例混合配制反应体系。
上机扩增:在荧光定量PCR仪上运行程序(通常包括逆转录、预变性和40个左右的扩增循环)。
结果分析:根据扩增曲线的Ct值(循环阈值)和荧光通道判定结果(阳性或阴性)。
✨ 产品特点
高特异性:专门针对副流感病毒Ⅲ型设计,与其他型别(如HPIV-1、HPIV-2、HPIV-4)及常见呼吸道病毒(如流感病毒、呼吸道合胞病毒)无交叉反应。
高灵敏度:最低检测限通常可达 10³ copies/mL,能够检出微量病毒,适用于早期感染诊断。
临床意义明确:副流感病毒Ⅲ型是引起婴幼儿下呼吸道感染(如毛细支气管炎、肺炎)和哮吼的主要病原体之一,尤其在秋冬季高发。
⚠️ 注意事项与储存
储存条件:试剂盒需在 -20℃ 条件下避光保存,避免反复冻融(尤其是酶液)。
有效期:一般为12个月(具体以包装盒标签为准)。
防止污染:操作必须严格分区(试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区),使用带滤芯的吸头,防止气溶胶污染。
结果解读:阴性结果不能完全排除感染,需结合患者的临床症状、流行病学史和其他检测结果综合判断。
�� 应用意义
临床诊断:辅助诊断由副流感病毒Ⅲ型引起的呼吸道感染,特别是针对婴幼儿、老年人及免疫低下人群。
鉴别诊断:由于副流感病毒引起的症状与普通感冒、流感及其他呼吸道病毒感染相似,核酸检测是进行精准鉴别诊断的金标准。
合理用药:快速明确病原体,有助于减少抗生素的滥用,指导临床进行针对性治疗。
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检测性能优势:
高灵敏度
最低检出限达100-500拷贝/mL,显著高于传统培养法(需10-10 CFU/mL)。
强特异性
采用荧光探针法,避免与其他链球菌交叉反应,特异性≥99%。
二、临床应用价值
快速出结果
全程检测时间1-2小时(含核酸提取),较培养法(24-48小时)效率提升显著。
自动化兼容
支持批量样本处理,可搭配全自动核酸提取仪,适合大规模筛查。
三、操作便捷性
样本类型灵活
适用于阴道拭子、直肠拭子及尿液样本,采集后可直接检测。
操作简化
部分试剂盒采用一体化设计(如卡尤迪产品),减少人工操作步骤
关键字: 副流感病毒;Ⅲ型;检测试剂盒;
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