产品介绍:
拟态弧菌核酸检测试剂盒(Vibrio mimicus Nucleic Acid Detection Kit)是基于分子生物学技术(如实时荧光PCR或恒温荧光法)设计的体外诊断工具,专门用于检测水产品、环境样本或临床样本中是否存在拟态弧菌的核酸。
产品名称 | 拟态弧菌核酸检测试剂盒 |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3149 |
�� 病原体背景与检测意义
拟态弧菌(Vibrio mimicus)是一种革兰氏阴性杆菌,属于弧菌科。它在生化特性上与霍乱弧菌(V. cholerae)极为相似,因此得名“拟态”。
致病性: 它是重要的食源性致病菌,可引起人类胃肠炎(腹泻、腹痛、呕吐),症状类似霍乱或细菌性痢疾。此外,它也可能导致伤口感染或败血症。
分布: 广泛存在于海水、河口水体及鱼、虾、贝类等水产品中。
检测价值: 由于其生化特性与霍乱弧菌相似,传统生化鉴定容易混淆。核酸检测具有高特异性,能精准区分拟态弧菌与霍乱弧菌、副溶血弧菌等近缘种,是食品安全监测和临床诊断的可靠手段。
检测原理
目前市面上的试剂盒主要采用以下两种技术原理:
实时荧光PCR法(qPCR)
原理: 采用TaqMan荧光探针技术。
靶标基因: 针对拟态弧菌的特异性保守序列设计引物和探针,常用的靶基因包括溶血素基因(vmh)、16S rRNA基因或toxR基因。
判读: 若FAM通道出现典型S型扩增曲线且Ct值≤35-40,判定为阳性。
恒温荧光法(如LAMP)
原理: 利用Bst DNA聚合酶在恒温(60-65℃)条件下进行链置换扩增。
优势: 无需热循环仪,反应速度快(30-60分钟),设备简单,适合基层或现场快速筛查。
试剂盒组成
标准配置通常包含以下组分:
组分名称 主要成分与功能
PCR反应液/预混液 含dNTPs、Mg²⁺、缓冲液。
酶混合液 含热启动Taq酶(qPCR法)或Bst酶(恒温法)。
引物/探针混合物 针对vmh或16S rRNA基因特异性设计。
阳性对照 含拟态弧菌目标基因片段的质粒或灭活菌液。
阴性对照 无核酸酶水,用于监控污染。
�� 样本要求与处理
适用样本:
食品/环境样本: 鱼、虾、贝类等水产品组织、水体样本。
临床样本: 腹泻患者的粪便、肛拭子、伤口分泌物等。
前处理(关键):
增菌(推荐): 由于样本中细菌含量可能较低,通常建议先在碱性蛋白胨水(含3% NaCl)中进行增菌培养(37℃, 4-15小时),以提高检出率。
DNA提取: 使用试剂盒配套的DNA提取试剂,或采用煮沸法、磁珠法从增菌液或纯培养菌落中提取模板DNA。
�� 性能特点
高特异性: 能特异性扩增拟态弧菌,不与霍乱弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌等其他常见弧菌发生交叉反应。
高灵敏度: 最低检测限通常可达 10³ CFU/mL 或 100-500 拷贝/毫升。
快速高效: 相比传统培养法(需24-48小时),PCR法通常在2小时内即可出结果。
⚠️ 注意事项
生物安全: 操作原始样本需在生物安全二级(BSL-2)实验室进行。
防止污染: PCR实验室必须严格分区(试剂准备区、样本处理区、扩增区),防止扩增产物气溶胶污染导致假阳性。
结果解读:
阳性: 提示样本中存在拟态弧菌核酸,具有食品安全或临床感染意义。
阴性: 不能完全排除污染(可能因细菌含量低于检测限或存在PCR抑制物)。对于临床高度疑似病例,建议结合培养法复核。
公司正在出售的产品:
胰岛素样蛋白3抗体 | PABPC4 多聚腺苷酸结合蛋白4抗体 |
FITC标记小鼠NK1.1单克隆抗体 | 芳基硫酸酯酶A抗体 |
ZFYVE21 锌指蛋白结构域ZFYVE21抗体 | FAM162A FAM162A蛋白抗体 |
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Sodium alginate 海藻酸钠抗体 | 大象孕激素/孕酮(PROG)核酸检测试剂盒 |
趋化因子结合蛋白2抗体 | 人CD30分子(CD30)核酸检测试剂盒 |
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兔白介素18(IL-18)PCR检测试剂盒 | 马白蛋白(Albumin)核酸检测试剂盒 |
小鼠水通道蛋白9(AQP-9)核酸检测试剂盒 | 大鼠髓系细胞触发受体-1(TREM-1)PCR检测试剂盒 |
注意事项:
1、严防污染
分区操作:必须在独立的生物安全柜内进行样本处理、试剂配制和加样,避免气溶胶交叉污染。
专用耗材:使用无核酸酶的枪头、EP管等,建议使用带滤芯枪头。
规范操作:加样后立即盖紧管盖,避免试剂外溅。
2、保证质量
样本处理:样本采集后应立即冷藏(2-8℃),长期保存需置于-70℃以下,避免反复冻融。
试剂保存:严格按照说明书要求的温度(通常是-20℃或2-8℃)保存试剂,避免反复冻融。
对照设置:每次实验必须设置阳性对照、阴性对照和空白对照,监控实验有效性。
3、注意安全
生物安全:阳性样本需按生物安全三级标准处理,实验人员需佩戴个人防护装备(PPE)。
废弃物处理:所有废弃物(包括耗材、样本)需经121℃高压灭菌30分钟后方可丢弃
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