产品介绍:
霍乱弧菌 CTX 基因核酸检测试剂盒是一种专门用于检测霍乱弧菌(Vibrio cholerae)是否携带霍乱毒素基因(CTX)的分子诊断工具。
与仅检测“霍乱弧菌是否存在”的试剂盒不同,CTX基因检测试剂盒的核心价值在于判断该菌株是否具有产毒能力(即致病力强弱)。霍乱毒素是导致患者剧烈腹泻和脱水的主要原因。
产品名称 | 霍乱弧菌 CTX 基因核酸检测试剂盒 |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3161 |
以下是关于这类试剂盒的详细介绍:
1. 核心检测靶标:CTX基因
检测目标:CTX基因簇,特别是其中的 ctxA(A亚单位)和 ctxB(B亚单位)基因。
临床意义:
产毒株判定:检测结果为阳性,意味着该菌株能产生霍乱毒素,属于致病性菌株(通常为O1群或O139群)。
毒力评估:非产毒株(CTX阴性)即使被检出,通常也只引起轻微症状或无症状携带。
2. 常见类型与技术原理
目前市面上的试剂盒主要采用实时荧光PCR法(qPCR),分为以下几种形式:
类型 检测内容 适用场景
CTX基因检测试剂盒 仅检测 ctxA / ctxB 基因 用于确认分离菌株的产毒能力,或直接检测样本中的毒素基因。
双重/多重检测试剂盒 同时检测 O1/O139群特异性基因 + CTX基因 最常用。既能鉴定血清群,又能确认毒力,一步到位。
通用型检测试剂盒 检测霍乱弧菌种属基因(如ompW) 用于初筛,确认样本中是否存在霍乱弧菌(无论是否产毒)。
3. 操作流程与关键步骤
使用该类试剂盒通常遵循以下标准流程:
样本处理:
临床样本:粪便、肛拭子。
环境/食品样本:水产品增菌液、水源水样。
注意:粪便和食品中常含有PCR抑制物,通常建议先进行增菌培养,或使用专用的DNA提取试剂盒纯化核酸。
核酸提取:采用煮沸法、磁珠法或试剂盒法提取样本中的DNA模板。
PCR扩增:
将DNA模板加入含引物和探针的反应液中。
在荧光定量PCR仪上运行程序(通常包括预变性、扩增循环)。
结果分析:
阳性:扩增曲线呈S型,且Ct值(循环阈值)低于设定阈值(如Ct ≤ 35),表示样本中含有产毒株。
阴性:无扩增曲线或Ct值高于阈值,表示未检测到CTX基因。
4. 性能特点
高特异性:引物和探针专门针对ctx基因设计,不会与其他非霍乱弧菌(如副溶血弧菌)发生交叉反应。
快速:整个检测过程(含核酸提取)通常在2-4小时内完成,而传统培养加生化鉴定需要24-48小时。
5. 注意事项与局限性
区分死/活菌:PCR检测的是DNA,因此无法区分细菌是死是活。如果样本经过消毒处理或细菌已死亡,仍可能检出阳性。
假阴性风险:如果样本中细菌含量极低,或核酸提取过程中发生降解,可能导致假阴性。
确认实验:根据《霍乱诊断标准》,虽然核酸检测非常准确,但确诊霍乱病例通常仍需获得活菌株(进行分离培养)。核酸检测更多用于早期快速筛查、疫情监测和分子流行病学调查。
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检测性能优势:
高灵敏度
最低检出限达100-500拷贝/mL,显著高于传统培养法(需10-10 CFU/mL)。
强特异性
采用荧光探针法,避免与其他链球菌交叉反应,特异性≥99%。
二、临床应用价值
快速出结果
全程检测时间1-2小时(含核酸提取),较培养法(24-48小时)效率提升显著。
自动化兼容
支持批量样本处理,可搭配全自动核酸提取仪,适合大规模筛查。
三、操作便捷性
样本类型灵活
适用于阴道拭子、直肠拭子及尿液样本,采集后可直接检测。
操作简化
部分试剂盒采用一体化设计(如卡尤迪产品),减少人工操作步骤
关键字: 霍乱弧菌 ;CTX 基因;检测试剂盒;
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