大鼠子宫成纤维细胞 新品

细胞简介：

大鼠子宫成纤维分离自子宫组织；子宫是孕育胎儿的器官，位于盆腔中部，膀胱与直肠之间，其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持，这些结构受损或松弛时，可以引起子宫脱垂。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的子宫成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。子宫成纤维细胞的主要特征：①是子宫的重要细胞组成，在体外易于培养；②在子宫损伤后能修复和重塑子宫；③在子宫炎症时能有效控制炎症扩散。

产品信息:

产品名称 大鼠子宫成纤维细胞

组织来源 子宫组织

默认种属 大鼠

产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介 公司实验室分离的大鼠子宫成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测 公司实验室分离的大鼠子宫成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠子宫成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

细胞培养步骤：

1. 细胞复苏

运输与接收：细胞以液氮冻存形式运输，收到后立即用75%酒精喷洒消毒细胞瓶，置于超净台内无菌操作。

复苏操作：将细胞瓶放入37℃、5% CO培养箱中静置3-4小时稳定状态，显微镜下观察细胞形态和密度，记录初始状态（建议40x、100x、200x各拍一张照片）。

2. 细胞传代

传代时机：当细胞密度达80%汇合度时进行传代。

操作步骤：

弃去旧培养基，用无钙镁PBS润洗细胞1-2次。

加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落。

加入5 mL完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞完全脱落。

离心（1000 RPM，5分钟），弃上清，用1-2 mL培养基重悬。

按1:2比例分瓶传代（如T25瓶分至两个T25瓶），补充新鲜培养基至5 mL。

换液频率：每2-3天换液一次。

3. 细胞冻存

冻存液：使用无血清冻存液。

冻存步骤：细胞传代后，用胰蛋白酶消化并离心，重悬于冻存液，缓慢降温至-80℃，最终转入液氮长期保存。

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使用细胞进行实验，请注意以下几点：

代数控制：尽量在低代数（如P3-P10）进行实验，以防止因传代过多导致的遗传漂移或功能衰退。

操作轻柔：原代细胞对环境变化敏感，解冻和传代时需格外小心，避免机械损伤。

营养需求：它们往往需要更复杂的营养成分（如特定的生长因子、血清），普通的培养基可能无法满足其生长需求。