伪结核棒杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Corynebacterium pseudotuberculosis Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR4501
产品特点
高特异性：引物基于伪结核棒杆菌保守序列设计，与其他病原体无交叉反应。
高灵敏度：检测限可达几百拷贝/反应。
操作简便：一管式闭管操作，减少污染风险，支持快速扩增（约1.5小时完成）。
稳定性强：预混反应体系（含荧光染料），即开即用，仅需提供DNA模板。
试剂盒组成
| 组分 | 规格 |
| 2×qPCR预混液（含染料） | 500 μL |
| 荧光PCR模板稀释液 | 1 mL |
| 伪结核棒杆菌特异性引物混合液 | 100 μL |
| 阳性对照（1×10^8 拷贝/μL） | 50 μL |
实验流程
样本处理：提取待测样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。
反应体系配制（20 μL/反应）：
2×qPCR预混液 10 μL
引物混合液 0.5 μL
DNA模板 2 μL
无核酸酶水补至20 μL
PCR程序：
预变性：95℃ 3分钟
扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环，荧光信号采集）
结果判读
定量分析：通过标准曲线计算样本拷贝数。
定性分析：
阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈典型S型。
阴性：Ct值≥40或无扩增。
可疑：Ct值35-40需复测，复测Ct<40判为阳性。
注意事项
实验需在无菌环境下操作，避免交叉污染。
阳性对照与样本需分区域操作。
试剂解冻后需彻底混匀，避免反复冻融。
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