黄热病病毒疫苗株17D 染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 黄热病病毒疫苗株17D 染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Yellow Fever Virus Vaccine Strain 17D Dye-based qRT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4545 |
检验原理
采用实时荧光定量PCR技术（TaqMan探针法或SYBR Green染料法），针对黄热病病毒疫苗株17D的保守基因区域（如E蛋白基因或3'-UTR）设计特异性引物及探针。通过检测扩增过程中释放的荧光信号，实现核酸的定性与定量分析。
核心性能参数
灵敏度
最低检测限：100-1000拷贝/反应（可达100拷贝/反应）。
特异性
可区分疫苗株17D与野生型黄热病毒。
内置对照
阳性对照（1×10⁷-1×10⁸拷贝/μL）及阴性对照（超纯水），确保实验有效性。
试剂盒组分
| 成分 | 规格/保存条件 |
| RT-PCR预混液（含酶） | 1 mL，-20℃避光保存 |
| 特异性引物-探针混合液 | 100 μL，-20℃保存 |
| 阳性对照 | 50 μL，-20℃单独存放 |
| 阴性对照（超纯水） | 1 mL，-20℃保存 |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 依配置 |
操作流程
RNA提取
使用商业化RNA提取试剂盒处理样本（如血液或细胞培养物）。
反应体系配制
每20 μL反应体系含：预混液、引物/探针、5 μL RNA模板。
PCR程序设置
逆转录：42-50℃ 10-30分钟 → 预变性：94-95℃ 5-10分钟 → 扩增（35-40循环）：95℃ 15-30秒 → 55-60℃ 30-40秒（荧光采集）。
注意事项
保存与运输
-20℃保存，有效期12个月；运输需低温条件。
应用限制
仅限科研使用，不可用于临床诊断。
质控要求
实验需严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区），避免交叉污染。
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