呼吸道合胞病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 呼吸道合胞病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Respiratory Syncytial Virus Dye-based qRT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4554 |
产品概述
本试剂盒基于SYBR Green I染料法,专用于呼吸道合胞病毒(RSV)RNA的荧光定量RT-PCR检测。通过优化的一管式反应体系,实现反转录与定量PCR同步进行,减少操作步骤并降低污染风险。适用于临床样本、环境监测及科研领域的病毒载量精准定量。
产品组分
2× RT-qPCR预混液:包含耐热反转录酶、热启动Taq DNA聚合酶及优化缓冲体系。
酶混合液:确保高效cDNA合成及靶标扩增。
无核酸酶水:用于反应体系配制。
阳性对照(非传染性DNA片段):用于标准曲线建立及实验质控。
技术参数
灵敏度:可检测低至0.1 pg病毒RNA(高表达靶标)或1 pg(中低表达靶标)。
特异性:引物针对RSV高度保守区设计,无交叉反应。
线性范围:定量检测覆盖5个数量级(10²~10⁷拷贝/μL)。
稳定性:预混液于4℃保存24小时性能不变。
操作流程
样本处理:提取待测RNA,避免反复冻融。
标准曲线制备:
将阳性对照按10倍梯度稀释(10²~10⁷拷贝/μL),独立分区操作以防污染。
PCR反应体系配制:
每20 μL反应体系含10 μL 2×预混液、0.5 μL酶混合液、1 μL模板RNA及8.5 μL无核酸酶水。
程序设置:
反转录:50℃ 15分钟 → 预变性:95℃ 5分钟 → 扩增(40循环):95℃ 10秒,60℃ 30秒(采集荧光)。
数据分析:通过熔解曲线验证扩增特异性,标准曲线计算病毒载量。
注意事项
实验需在无核酸污染环境下进行,建议使用带滤芯枪头。
阳性对照不可直接接触活病毒样本。
本试剂盒仅限科研或临床诊断使用,操作需符合生物安全规范。
储存与运输
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
有效期:12个月。
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