戈氏放线菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 戈氏放线菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Actinomyces gerencseriae Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4559 |
产品特点
即开即用:用户仅需提供戈氏放线菌DNA模板。
高特异性:基于戈氏放线菌保守序列设计的引物,无交叉反应。
高灵敏度:检测下限可达数百拷贝/反应。
闭管检测:一管式荧光定量PCR,避免气溶胶污染。
规格及组分
| 成分 | 规格/包装 | 保存条件 |
| 2×qPCR MagicMix | 500 μL(棕色管) | -20℃避光 |
| 荧光PCR模板稀释液 | 1 mL(黄盖) | -20℃ |
| 引物混合物 | 100 μL(白盖) | -20℃避光 |
| 阳性对照(1×10⁸拷贝/μL) | 50 μL(红盖) | -20℃ |
| 使用手册 | 1份 | 常温 |
自备试剂
DNA模板、10×ROX校正染料(根据机型需求选择)。
运输与保存
运输:低温干冰运输。
保存:-20℃避光保存,有效期12个月。
使用方法
阳性对照稀释(10²~10⁷拷贝/μL梯度制备)
注意事项:操作需在独立洁净区域进行,避免污染试剂盒其他组分。
标记离心管:编号为2~7号,每管加入45 μL模板稀释液。
梯度稀释:
7号管:加入5 μL阳性对照(1×10⁸拷贝/μL),震荡混匀,得1×10⁷拷贝/μL。
依次转移5 μL至下一管,连续稀释至2号管(1×10²拷贝/μL)。
保存:稀释后标准品置于冰上备用。
PCR反应体系
每20 μL反应体系建议配比:
2×qPCR MagicMix:10 μL
引物混合物:2 μL
DNA模板:2 μL
ROX(可选):0.4 μL
超纯水:补至20 μL
扩增程序
(需根据机型优化,以下为通用参考):
预变性:95℃ 3分钟
循环阶段(40 cycles):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号)
注意事项
阳性对照为DNA片段,非活体样本。
实验废弃物需按生物安全规范处理。
避免反复冻融试剂,分装后使用。
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