产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术开发,专用于检测里氏立克次氏体(Rickettsia risticii)的核酸,适用于科研用途(不可用于临床诊断)。试剂盒包含优化的引物、阳性对照及预混反应体系,具有高灵敏度和特异性,可进行定性与定量分析。
产品名称 | 里氏立克次氏体染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Rickettsia rickettsii Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4411 |

产品特点

即开即用:用户仅需提供待测DNA模板。
高灵敏度:检测限可达几百拷贝/反应,线性范围覆盖至少5个数量级。
特异性强:引物针对保守序列设计,避免与其他病原体核酸交叉反应。
质量控制:提供阳性对照(1×10⁸ 拷贝/μL),便于区分假阴性结果。
兼容性:支持多数荧光定量PCR仪,信号采集建议在复性或延伸步骤(激发波长471 nm,发射波长530 nm)。
包装规格

| 成分 | 规格/包装量 | 备注 |
| PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(红盖) | 预混反应液 |
| 超纯水 | 1 mL(亮黄色) | 稀释模板用 |
| 引物混合液 | 100 μL(白盖) | 特异性引物 |
| 阳性对照 | 50 μL(黄盖) | 1×10⁸ 拷贝/μL |
| 使用手册 | 1份 | 操作指南 |
操作流程

1. 阳性对照稀释(10²-10⁷ 拷贝/μL梯度制备)
注意事项:操作需在独立区域进行,避免污染。
步骤:
标记6管,分别加入45 μL稀释液。
取5 μL阳性对照(1×10⁸ 拷贝/μL)加入第1管,震荡混匀,得10⁷ 拷贝/μL梯度,依次稀释至10² 拷贝/μL。
2. PCR反应体系(20 μL体系)
按比例加入预混液、引物、模板DNA及ROX校正染料(需自备)。
3. 上机检测
程序设置:95℃预变性2分钟;95℃ 15秒→60℃ 60秒(40循环)。
4. 数据分析
定量检测:以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线,计算样本浓度。
定性检测:
阴性:Ct≥40;阳性:Ct≤35;
35<Ct<40需复测,复测Ct<40判为阳性。
保存与运输
保存条件:-20℃避光保存,有效期12个月。
运输方式:低温运输。
注意事项

本产品仅限科研使用。
避免反复冻融,开封后尽快使用。
操作时需穿戴防护装备,废弃物料按生物危害品处理。
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