产品特点

即开即用:预混优化试剂,用户仅需提供DNA模板。
高特异性:引物针对Rickettsia typhi保守序列设计,无交叉反应。
灵敏度高:检测下限可达10²拷贝/μL,线性范围覆盖5个数量级(10²~10⁷拷贝/μL)。
内置对照:含阳性对照(非活体DNA片段,10⁸拷贝/μL)及上样染料,便于结果判读。
双重应用:支持定性与定量检测,兼容常规PCR仪及荧光定量PCR仪。
产品名称 | 莫氏立克次体(现名伤寒立克次体)染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Rickettsia typhi Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4415 |

试剂盒组分

| 成分 | 包装规格 | 说明 |
| PCR预混液(含染料) | 1 mL | 含dNTPs、Taq酶、Mg²⁺等 |
| 阳性对照DNA | 50 μL(10⁸拷贝/μL) | 需独立存放,避免污染 |
| 核酸释放剂(选配) | 1 mL | 用于样本前处理 |
| 超纯水 | 1 mL | 稀释模板用 |
| 使用说明书 | 1份 | 含操作流程及数据分析方法 |
实验步骤

1. 样本制备
提取待测样本DNA,建议浓度≥10 ng/μL。
2. 阳性对照稀释(梯度制备)
按10倍梯度稀释阳性对照(10⁸拷贝/μL)至10²~10⁷拷贝/μL,用于标准曲线绘制。
3. PCR反应体系
每20μL反应体系:
预混液10 μL
引物混合液2 μL
模板DNA 2 μL
超纯水补至20 μL
4. 扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
| 变性 | 95℃ | 15 sec | 40 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 30 sec | |
| 荧光采集 | 60℃ | 30 sec | |
5. 数据分析
通过Ct值与标准曲线计算样本拷贝数,阈值设定为扩增曲线指数增长初期。
注意事项

实验分区操作,避免气溶胶污染。
阳性对照需单独存放,使用后彻底清洁工作台。
试剂解冻后需涡旋混匀,避免反复冻融(≤3次)。
本产品仅限科研使用,不可用于临床诊断。
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关键字: 莫氏立克次体(现名伤寒立克次体);染料法荧光定量;PCR试剂盒;