预期用途

本试剂盒用于体外定性或定量检测临床样本(如血清、血浆或组织)中的克里米亚-刚果出血热病毒RNA,适用于病原学诊断及流行病学监测。
产品名称 | 克里米亚-刚果出血热病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Crimean-Congo Hemorrhagic Fever Virus Dye-based qRT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4450 |

检验原理

采用染料法荧光定量RT-PCR技术,通过特异性引物和荧光染料(如SYBR Green)对CCHFV RNA靶标进行扩增检测。实时监测荧光信号,通过Ct值判定病毒载量。
试剂组成

酶混合液:50μL×1管(含逆转录酶、热启动DNA聚合酶等)
CCHFV反应液:500μL×2管(含预混引物、dNTPs、缓冲液等)
阳性质控品(20×10^7拷贝/mL):50μL×1管
阴性质控品:250μL×1管
说明:不同批号试剂禁止混用。
操作步骤

样本处理:按规范提取RNA,避免降解。
反应体系配制:每20μL反应体系含10μL反应液、2μL酶液、2μL模板RNA及6μL无核酸酶水。
PCR程序设置:
逆转录:50℃ 15分钟
预变性:95℃ 2分钟
扩增循环(40次):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光)
结果分析
阳性:Ct值≤35,扩增曲线呈典型指数增长。
可疑:35<Ct值≤38,需重复检测;若重复结果仍在此范围且曲线正常,判为阳性。
阴性:无扩增曲线或Ct值>38。
注意事项

严格分区操作(样本处理、试剂配制、扩增),避免交叉污染。
试剂使用前需完全融化并短暂离心,避光保存反应液。
实验废弃物按《病原微生物实验室生物安全管理条例》处理,使用10%次氯酸或75%乙醇消毒台面。
本试剂仅限专业人员使用,检测结果需结合临床表现及其他指标综合判断。
储存及有效期
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
有效期:12个月。
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