采用双抗体夹心ELISA法。将抗大鼠DDAH1抗体包被在酶标板上，样本中的DDAH1与包被抗体结合，接着加入生物素化的抗DDAH1抗体，之后加入辣根过氧化物酶标记的亲和素。最后加TMB显色，根据OD值和标准曲线计算样本中DDAH1的浓度。
产品名称 | 大鼠二甲基精氨酸二甲胺水解酶1(DDAH1)elisa试剂盒 | 灵敏度 | 0.078125ng/ml |
英文名称 | RatDDAH1 elisa kit | 货号 | PR9808 |
检测范围 | 0.15625ng/ml-10ng/ml | 品牌 | 派瑞曼 |
夹心法数据：
以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
| 校准品浓度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000 |
夹心法标曲：
核心参数：
检测原理：双抗体夹心法 ELISA
种属反应性：大鼠
检测时间：1.5-2.5h
保存条件：2-8℃避光冷藏
特异性：无同源水解酶交叉反应
板内变异系数：＜8%
操作步骤:
试剂盒平衡：实验前20分钟将试剂盒从冰箱取出，平衡至室温（20-25℃）
板条准备：从铝箔袋中取出所需板条，剩余板条密封放回2-8℃保存
加样
标准品孔：加入不同浓度标准品50μL（浓度通常为10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125μg/mL）
样本孔：先加样本稀释液40μL，再加待测样本10μL（最终稀释5倍）
空白孔：不加任何液体
加酶标抗体：除空白孔外，每孔加入HRP标记的检测抗体100μL
温育：封板膜封板后，37℃温育60分钟
洗涤
弃去孔内液体，吸水纸上拍干
每孔加满洗涤液（350μL），静置1分钟后弃去，重复洗板5次
最后一次洗涤后彻底拍干孔内液体
显色：每孔加入显色剂A、B各50μL，轻轻混匀，37℃避光显色15分钟
终止反应：每孔加入终止液50μL，蓝色立即转为黄色
读数：15分钟内用酶标仪在450nm波长处测定各孔OD值
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