采用双抗体夹心法ELISA技术:将捕获抗体包被于酶标板上,捕获样品及标准品中的待测物AAL,孵育清洗后,再加入标记的检测抗体进行孵育后清洗,形成捕获抗体-抗原-检测抗体免疫复合物,随后加入链霉亲和素偶联的辣根过氧化物酶进行孵育,待孵育结束后清洗,接着加入TMB显色液后,若样本中有待测物则显蓝色,加入终止液停止反应,通过酶标仪读取OD值,结合标准曲线计算样本中AAL的浓度。
产品名称
大鼠花生四烯酸脂氧合酶代谢产物(AAL)elisa试剂盒
灵敏度
0.078125ng/ml
英文名称
RatAAL elisa kit
货号
PR10762
检测范围
0.15625ng/ml-10ng/ml
品牌
派瑞曼
夹心法数据:
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
夹心法标曲:
核心参数:
原理:双抗体夹心法 ELISA
种属:大鼠特异性
样本:血清、血浆、细胞上清、组织匀浆
时长:3-4h
保存:2-8℃避光冷藏
特异性:专一识别大鼠 AAL,无交叉反应
板内 CV:<8%
板内 CV:<8%样本处理指南:
血清样本
全血标本室温放置2小时或4℃过夜
1000×g离心20分钟,取上清液检测
暂不检测的样本按单次用量分装,-20℃/-80℃冻存,避免反复冻融
血浆样本
采用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本
采集后30分钟内于2-8℃环境下1000×g离心15分钟
取上清液检测,避免使用溶血、高血脂样本
组织匀浆样本
预冷PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液
按1:9重量体积比加入PBS(1g组织对应9mL PBS),可添加蛋白酶抑制剂
冰上充分研磨或超声破碎,5000×g离心5-10分钟
取上清液检测
细胞培养上清样本
1000×g离心20分钟,去除细胞碎片
取上清液检测,避免使用含NaN3的样本(会抑制HRP酶活性)
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上海博湖生物科技有限公司
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