本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理,酶标板包被有大鼠CA199特异性捕获抗体。检测时,样本、标准品中的CA199抗原与固相抗体特异性结合,洗板后加入辣根过氧化物酶标记的CA199检测抗体,形成夹心免疫复合物。经底物显色、终止反应后,显色深浅与样本中CA199含量呈正相关,通过酶标仪检测吸光度并结合标准曲线,可定量检测大鼠CA199的表达水平。
基本参数:

产品名称:大鼠胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒
英文名称:Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit
货号:Y-E1359
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度≤1.2U/mL
检测范围:2U/mL - 80U/mL
反应时间:全程120分钟,孵育60分钟,酶孵育30分钟,显色30分钟
保存条件:2-8℃冷藏保存,标准品-20℃分装冻存,避免反复冻融
有效期:原装有效期12个月,开封试剂30天内有效
特异性:特异性结合大鼠CA199抗原,与CEA、CA125等肿瘤标志物无交叉反应
重复性:板内CV≤4%,板间CV≤6%
注意事项:炎症、黄疸样本可能存在轻微干扰,需设置空白对照;加样精准度直接影响结果,需规范加样操作。
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

微孔板室温平衡 30min,梯度稀释 CA199 标准品,血清样本稀释处理,空白孔加稀释液,每孔上样 50μL。
每孔加入 CA199 酶标抗体 50μL,密封酶标板,37℃避光孵育 72min。
洗板 6 次,每次洗涤液浸泡 40s,倒扣拍净微孔内残留液体。
加入显色 A、B 液各 50μL,轻微震荡混匀,37℃显色 21min。
快速加入终止液 50μL 终止底物反应。
酶标仪 450nm 波长检测 OD 吸光度。
标准曲线计算稀释后浓度,乘以稀释倍数得到样本 CA199 浓度。
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