本试剂盒针对头孢霉属真菌保守基因设计特异性引物探针，采用PCR扩增技术实现头孢霉属真菌的广谱快速检测。头孢霉属真菌易污染饲料、养殖环境，可引发畜禽真菌性感染、饲料霉变变质，危害养殖生产与畜禽健康。本试剂盒可一次性筛查多种头孢霉属致病真菌，检测特异性高，可区分头孢霉与曲霉、青霉等近缘真菌，检测周期短、结果精准，适配饲料质检、养殖环境真菌监测、畜禽真菌病病因排查等场景，为养殖真菌病害防控与饲料安全管控提供支撑。
产品名称 | 头孢霉属通用PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P013999 |
英文名称 | Cephalosporium spp.PCR | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理：
提取霉菌培养物、霉变粮食样本真菌 DNA，靶向头孢霉属 ITS 间隔区通用引物普通 PCR，电泳条带判定属阳性。
荧光定量通用 PCR，特异性探针识别头孢霉属共有核酸序列，区分曲霉、青霉等近缘霉菌。
真菌细胞壁裂解耦合 PCR，试剂盒裂解液高效释放霉菌基因组 DNA，通用引物完成头孢霉属核酸特异性扩增。
操作步骤：
样本处理（样本处理区）
推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。
试剂配制（试剂准备区）
反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。
PCR扩增（核酸扩增区）
循环参数：
预变性：95℃ 2min（1循环）；
扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。
结果分析
阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；
阴性：无Ct值或曲线平直；
可疑：40<Ct≤45，需复测确认。
质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。
注意事项：
所有试剂避免反复冻融，可分装小体积冻存；融化后冰上放置不超过 2 h，酶失活会直接导致无扩增条带
阳性质粒拷贝数极高，开盖全程在生物安全柜操作，防止气溶胶污染实验室
所有耗材必须无核酸酶，枪头一次性使用；实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃
试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用
仅限科研检测，严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景
土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸，减少抑制剂干扰
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