本试剂盒采用特异性荧光PCR技术，专注检测毛样枝孢霉核酸，适配空气沉降样本、饲料、土壤、畜禽皮肤组织等样本。毛样枝孢霉是高污染性真菌，易引发过敏性病害与畜禽浅表真菌感染，常规真菌镜检鉴定难度大、准确率低。本试剂盒通过基因精准扩增，特异性强、检测灵敏度高，可快速完成样本筛查与菌种鉴定，检测流程标准化，适配基层检测站点、养殖企业、食品加工企业的日常真菌监测与病害溯源工作。
产品名称 | 毛样枝孢霉PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P014022 |
英文名称 | Cladosporium trichoidesPCR | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理：
植物病害叶片真菌核酸提取，毛样枝孢霉特有间隔区基因引物 PCR，电泳条带鉴定致病霉菌。
单重 TaqMan 荧光 PCR，探针仅结合毛样枝孢霉靶序列，排除卡氏枝孢霉交叉阳性。
植物组织粗提 PCR，叶片无需纯化核酸，试剂盒缓冲液中和植物多酚抑制剂，稳定扩增靶基因。
操作步骤：
样本制备：
使用CTAB法或商业DNA提取试剂盒从组织中提取基因组DNA。
建议DNA浓度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。
反应体系配制（20 μL体系示例）：
预混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）
特异性引物混合液
模板DNA（2~5 μL）
补充无核酸酶水至终体积。
PCR扩增程序：
预变性：95℃ 5分钟；
循环阶段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；
熔解曲线分析：60~95℃（可选，用于验证扩增特异性）。
结果判读：
阳性：Ct值≤35且熔解曲线峰单一；
阴性：Ct值≥40或无扩增曲线；
可疑：35<Ct值<40，建议复测或结合熔解曲线分析。
注意事项：
所有耗材必须无核酸酶，吸头一次性使用，禁止重复吸取；
阳性模板拷贝浓度高，开盖操作轻柔，避免气溶胶扩散造成全域污染；
试剂融化后冰上放置不超过 2 h，用完立即放回 - 20℃；
废弃 PCR 管、扩增产物、实验废液统一 121℃高压灭菌后丢弃；
试剂盒仅用于动植物、水产、微生物疫病科研检测，禁止人体临床检测；
移液器、操作台定期紫外消毒，长期污染需更换全新试剂盒全套试剂。
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