大鼠肺微血管内皮细胞
产品信息:

英文名称:Rat Pulmonary Microvascular Endothelial Cells
组织来源:肺组织
默认种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
产品名称 | 大鼠肺微血管内皮细胞 | 组织来源 | 肺组织 |
英文名称 | Rat Pulmonary Microvascular Endothelial Cells | 货号 | A01X1515 |
方法简介 公司实验室分离的大鼠肺微血管内皮采用组织贴块法并结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠肺微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
细胞简介:

大鼠肺微血管内皮分离自肺组织;肺是机体的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆盖于心之上。肺有分叶,左二右三,共五叶。肺经肺系(指气管、支气管等)与喉、鼻相连,故称喉为肺之门户,鼻为肺之外窍。微血管内皮细胞密切参与包括再生、发育、伤口愈合等一系列生理及炎症反应。细胞呈梭形或多角形,形成单层后呈鹅卵石样或铺路石样排列。肺微血管内皮细胞构成半选择性屏障,该屏障对于肺气体交换,调节液体和可溶物在血液与肺间质之间的流动具有重要意义。
培养信息:

包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞培养操作:

消化培养法
此方法利用酶(如胰蛋白酶、胶原酶)将组织分散成单个细胞或细胞团,形成细胞悬液进行培养,细胞生长较快。
取材与剪切
同样在无菌条件下获取组织,并用Hanks液清洗干净。
将组织剪切成更小的碎块(约 1 mm3),以便酶更好地发挥作用。
酶消化
将组织块转移至容器中,加入适量的酶消化液(如0.25%胰蛋白酶)。
在 37℃ 条件下消化 20-40分钟,期间可适当摇动或吹打。消化程度需在显微镜下观察,当组织分散成细胞团或单个细胞时,立即终止消化。
终止与洗涤
加入含血清的培养液以终止酶的消化作用(血清可抑制胰蛋白酶活性)。
将细胞悬液通过筛网过滤,除去未消化的组织块。然后以 1000 rpm 离心 5-10分钟,弃去上清液。
接种与培养
用适量新鲜培养液重悬细胞沉淀,进行细胞计数,并调整细胞密度至实验所需浓度(例如 5×10 cells/mL)。
将细胞悬液分装至培养瓶中,放入 37℃、5% CO 培养箱中静置培养。
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实验注意点:
代数控制:尽量在低代数(如P3-P10)进行实验,以防止因传代过多导致的遗传漂移或功能衰退。
操作轻柔:原代细胞对环境变化敏感,解冻和传代时需格外小心,避免机械损伤。
营养需求:它们往往需要更复杂的营养成分(如特定的生长因子、血清),普通的培养基可能无法满足其生长需求。
关键字: 大鼠肺微血管内皮细胞;肺组织;贴壁;
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