大鼠小肠隐窝上皮细胞
产品信息:

英文名称:Rat Small Intestine Crypt Epithelial Cells
组织来源:小肠组织
默认种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
方法简介 公司实验室分离的大鼠小肠隐窝上皮采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠小肠隐窝上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 大鼠小肠隐窝上皮细胞 | 组织来源 | 小肠组织 |
英文名称 | Rat Small Intestine Crypt Epithelial Cells | 货号 | A01X1562 |
细胞简介:

大鼠小肠隐窝上皮分离自小肠组织;小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连,是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内,上连胃幽门,下接盲肠,分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的,因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后,基本上完成了消化过程,同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞,粘膜有许多绒毛,绒毛根部的上皮下陷至固有层,形成管状的肠腺,其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切;构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似,接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似,绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短,不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能,其中以吸收和分泌功能为主。小肠腔面的环行皱襞从幽门附近开始出现,在十二指肠末段和空肠头段极发达,向下逐渐减少和变矮,至肠中段以下基本消失。粘膜表面还有许多细小的肠绒毛,是由上皮和固有层向肠腔突起而成,形状不一,以十二指肠和空肠头段发达。绒毛于十二指肠呈叶状,于空肠呈指状,于回肠则细而短。环行皱襞和绒毛使小肠表面积扩大20-30倍,绒毛根部的上皮下隐至固有层形成管状的小肠腺,又称肠隐窝,故小肠腺与绒毛的上皮是连续的,小肠腺直接开口于肠腔。
培养信息:

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞培养操作:

消化培养法
此方法利用酶(如胰蛋白酶、胶原酶)将组织分散成单个细胞或细胞团,形成细胞悬液进行培养,细胞生长较快。
取材与剪切
同样在无菌条件下获取组织,并用Hanks液清洗干净。
将组织剪切成更小的碎块(约 1 mm3),以便酶更好地发挥作用。
酶消化
将组织块转移至容器中,加入适量的酶消化液(如0.25%胰蛋白酶)。
在 37℃ 条件下消化 20-40分钟,期间可适当摇动或吹打。消化程度需在显微镜下观察,当组织分散成细胞团或单个细胞时,立即终止消化。
终止与洗涤
加入含血清的培养液以终止酶的消化作用(血清可抑制胰蛋白酶活性)。
将细胞悬液通过筛网过滤,除去未消化的组织块。然后以 1000 rpm 离心 5-10分钟,弃去上清液。
接种与培养
用适量新鲜培养液重悬细胞沉淀,进行细胞计数,并调整细胞密度至实验所需浓度(例如 5×10 cells/mL)。
将细胞悬液分装至培养瓶中,放入 37℃、5% CO 培养箱中静置培养。
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实验注意点:
代数控制:尽量在低代数(如P3-P10)进行实验,以防止因传代过多导致的遗传漂移或功能衰退。
操作轻柔:原代细胞对环境变化敏感,解冻和传代时需格外小心,避免机械损伤。
营养需求:它们往往需要更复杂的营养成分(如特定的生长因子、血清),普通的培养基可能无法满足其生长需求。
关键字: 大鼠小肠隐窝上皮细胞;小肠组织;贴壁;
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