无色小杆菌属 新品

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无色小杆菌属是一类不产生色素的革兰氏阴性小杆菌，广泛分布于土壤、水体等环境。该属细菌能分解多种有机物，在生态系统物质循环与环境微生物学研究中具有基础意义。
培养基  蛋白胨：10.0，牛肉粉：3.0，氯化钠：5.0，琼脂：15.0，pH值：7.3±0.1(25℃)

生长条件  30℃；24-48h；好氧；

存储条件  2-8℃

安全等级  1

形态  菌落直径为0.5-1mm，圆形，边缘整齐，正面淡黄色，中间凸起，表面光滑，表面明亮，质地湿润，不产色素，G－（红），杆菌，纯度：纯

模式菌株  no

操作步骤  ①准备上述新鲜平板 1-2 块；②安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取0.5mL无菌水入冻干管，充分溶解后，混匀；④吸取0.2mL菌悬液打入平板中，涂布均匀，重复两次获得两个平板；⑤置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

应用领域  用于合成可降解塑料—聚羟基丁酸(PHB)的研究。

共享方式  公益性共享

菌种保存:

低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素，所以，菌种保藏方法虽多，但都是根据这三个因素而设计的。

保藏方法大致可分为以下几种：

1．传代培养 保藏法

又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌 用），培养后于4—6℃冰箱内保存。

2．液体石蜡覆盖保藏法

是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。

3．载体保藏法

是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。

4．寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。

5．冷冻保藏法

可分低温冰箱（-20—-30℃，-50—-80℃）、干冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6．冷冻干燥保藏法

先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥）。

有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液，以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。

菌种活化与培养:

菌种活化

从冻存管或斜面培养基中取出菌种，接种至新鲜培养基中

在适宜条件下（如37°C，摇床培养）进行预培养，使菌种恢复活性。

扩大培养

将活化后的菌液按一定比例接种至新鲜培养基中。

控制培养条件（温度、转速、通气量等），确保菌体生长处于对数期。

菌液浓度测定

使用分光光度计测定OD600值，评估菌液浓度。

根据实验需求调整菌液浓度。

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