大鼠视网膜微血管内皮细胞
产品信息：
英文名称 | Rat Retinal Microvascular Endothelial Cells | 种属 | 大鼠 |
产品规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | A01X1732 |
组织来源 | 视网膜组织 | 生长特性 | 贴壁 |
细胞简介：
大鼠视网膜微血管内皮分离自视网膜组织；视网膜居于眼球壁的内层，是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成，两层间在病理情况下可分开，称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连，由色素上皮细胞组成，它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层，由外向内分别为：色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜，有感光作用；后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。神经元是视细胞层，专司感光，它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上，而视锥细胞则在中心凹处多。层叫双节细胞，约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系，负责联络作用。第三层叫节细胞层，专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构，它贴于眼球的后壁部，传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面，经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的，在黄斑区，其分辨能力强。它是组成血管腔面单层扁平上皮样细胞，它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用，在视网膜血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。由于从不同的组织和器官获得的内皮细胞具有不同的特性，在脑和视网膜中，这些内皮细胞具有内屏障的功能，在调节血管生理状态，释放血管活性物质以及新生血管的形成中发挥着重要作用，体外分离培养RCEC对研究视网膜血管性疾病发生发展的病理生理机制以及疾病的早期防治具有重要临床意义。
方法简介 公司实验室分离的大鼠视网膜微血管内皮采用胶原酶-混合消化法结合密度梯度离心法、后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠视网膜微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
关键操作技巧与注意事项：
成功的原代培养依赖于严谨的细节控制：
严格无菌操作：这是实验成功的基石。所有操作需在生物安全柜中进行，试剂和耗材必须无菌。
保持静置：细胞接种后的最初24-48小时内，应保持培养瓶绝对静置，避免频繁取出观察或晃动，这有助于细胞贴壁和伸展。
优化消化过程：
消化时间要恰到好处，过长会损伤细胞，过短则细胞分散不佳。
胶原酶对组织的损伤较小，常用于分离活性要求高的细胞；胰蛋白酶作用较强，需严格控制时间。
酶液应新鲜配制，避免活性下降。
控制接种密度：原代细胞在低密度下不易存活，建议适当提高初始接种密度，以保证细胞间的相互作用促进其生长。
定期换液：根据培养基颜色变化（如变黄）或每隔2-3天更换一次培养液，以清除代谢废物并补充营养。
公司正在出售的产品：
人程序性细胞死亡因子4(PDCD4)PCR检测试剂盒 | RNF15, Alexa Flour 750 conjugated AF750标记的环指蛋白15抗体 |
大鼠细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)PCR检测试剂盒 | 癌胚抗原相关细胞粘附分子21抗体 |
小鼠肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)PCR检测试剂盒 | P因子/备解素抗体 |
大鼠肺炎病毒抗体(PV-Ab)核酸检测试剂盒 | CCNDBP1 周期素D结合蛋白1抗体 |
豚鼠泛素(Ub)PCR检测试剂盒 | 组蛋白相关Bmi1抗体 |
生物素标记的髓鞘碱性蛋白/磷脂碱性蛋白抗体 | SLC35D2 溶质载体家族蛋白35成员D2抗体 |
Bone Alkaline Phosphatase 骨碱性磷酸酶抗体 | NC膜0.45μm 15cm×20cm/张 |
细胞质FMR1相关蛋白2抗体 | 内源性硫化氢H2S测试盒 50T/48样 比色法 |
核因子κB抑制蛋白β单克隆抗体 | 小鼠维生素K1(VK1)PCR检测试剂盒 |
KIAA1609 KIAA1609蛋白抗体 | 大鼠α-辅肌动蛋白1(ACTN-1)核酸检测试剂盒 |
Claudin 22 紧密连接蛋白22抗体 | 人间变性淋巴瘤激酶(ALK)核酸检测试剂盒 |
二氢嘧啶酶相关蛋白5单克隆抗体 | 谷氨酸测试盒 50管/48样 紫外比色法 |
FAM190A FAM190A蛋白抗体 | 小鼠链球菌(SK)抗体(IgG)核酸检测试剂盒 |
乙酰化组蛋白H3抗体 | phospho-Histone H3 (Ser10) 磷酸化组蛋白H3重组鼠单克隆抗体 |
大鼠真皮毛乳头细胞 | 大鼠视网膜微血管内皮细胞Rat Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells |
小鼠舌表皮细胞 | Mouse primary choroidal fibroblasts |
细胞培养操作
消化培养法
此方法利用酶（如胰蛋白酶、胶原酶）将组织分散成单个细胞或细胞团，形成细胞悬液进行培养，细胞生长较快。
取材与剪切
同样在无菌条件下获取组织，并用Hanks液清洗干净。
将组织剪切成更小的碎块（约 1 mm3），以便酶更好地发挥作用。
酶消化
将组织块转移至容器中，加入适量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。
在 37℃ 条件下消化 20-40分钟，期间可适当摇动或吹打。消化程度需在显微镜下观察，当组织分散成细胞团或单个细胞时，立即终止消化。
终止与洗涤
加入含血清的培养液以终止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。
将细胞悬液通过筛网过滤，除去未消化的组织块。然后以 1000 rpm 离心 5-10分钟，弃去上清液。
接种与培养
用适量新鲜培养液重悬细胞沉淀，进行细胞计数，并调整细胞密度至实验所需浓度（例如 5×10 cells/mL）。
将细胞悬液分装至培养瓶中，放入 37℃、5% CO培养箱中静置培养。
关键字： 大鼠视网膜微血管内皮细胞;视网膜组织;贴壁;
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