大鼠骨髓单核细胞

大鼠骨髓单核细胞

产品信息：

英文名称：Rat Bone Marrow Monocyte Cells

组织来源：骨髓

默认种属 大鼠

产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介 公司实验室分离的大鼠骨髓单核采用密度梯度离心法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测  公司实验室分离的大鼠骨髓单核经CD68免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

 细胞简介：

大鼠骨髓单核分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓单核细胞是一种未成熟的单核细胞，在骨髓细胞中约占0.04%，被认为是破骨细胞的前体细胞，较外周血单个核细胞诱导的破骨细胞得率高、全骨髓诱导法产生的破骨细胞数量多，纯度高，较脾细胞诱导法分化效率高。骨髓单核细胞（BMMNCs）是从股骨或胫骨骨髓中分离提取出来的原代细胞，它属干细胞类型。目前，大多数研究用淋巴分离液分离提取骨髓单核细胞，近也有采用免疫磁珠分离法分离骨髓单核细胞。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 巨噬细胞样

传代特性 不增殖；不传代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞培养操作：

消化培养法

此方法利用酶（如胰蛋白酶、胶原酶）将组织分散成单个细胞或细胞团，形成细胞悬液进行培养，细胞生长较快。

取材与剪切

同样在无菌条件下获取组织，并用Hanks液清洗干净。

将组织剪切成更小的碎块（约 1 mm3），以便酶更好地发挥作用。

酶消化

将组织块转移至容器中，加入适量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。

在 37℃ 条件下消化 20-40分钟，期间可适当摇动或吹打。消化程度需在显微镜下观察，当组织分散成细胞团或单个细胞时，立即终止消化。

终止与洗涤

加入含血清的培养液以终止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。

将细胞悬液通过筛网过滤，除去未消化的组织块。然后以 1000 rpm 离心 5-10分钟，弃去上清液。

接种与培养

用适量新鲜培养液重悬细胞沉淀，进行细胞计数，并调整细胞密度至实验所需浓度（例如 5×10 cells/mL）。

将细胞悬液分装至培养瓶中，放入 37℃、5% CO 培养箱中静置培养。

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尽管价值巨大，但原代细胞的研究和应用也面临着显著的挑战：

获取困难：需要从新鲜组织中分离，对取材时间（通常在4-6小时的黄金窗口期内）、无菌操作和组织活性都有极高要求。

培养苛刻：原代细胞非常脆弱，需要特定的、成分复杂的培养基和生长因子，对培养环境（如温度、pH值）极为敏感。

批次差异：由于来源于不同的供体，不同批次的细胞在遗传背景和生理状态上存在固有差异，这给实验的可重复性带来了挑战。

成本高昂：从获取、分离到培养，整个过程耗时、费力且昂贵。