兔骨骼肌成纤维细胞
产品信息:

英文名称:Rabbit Skeletal Muscle Fibroblast Cells
组织来源:骨骼肌
默认种属 兔
产品规格 5×10^5Cells/T25
方法简介 实验室分离的tu骨骼肌成纤维采用-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测 实验室分离的兔骨骼肌成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
细胞简介:

兔骨骼肌分离自四肢肌肉组织;骨骼肌又称横纹肌,肌肉中的一种,约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞,肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌,横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官,有丰富的血管、淋巴分布,在躯体神经支配下收缩或舒张,进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状,不分支,有明显横纹,核很多,且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带(Ⅰ带)及暗带(A带)。明带染色较浅,而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间,有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段,叫做一个肌节。骨骼肌细胞也称横纹肌细胞,细胞呈纤维状,不分支,有明显横纹,核很多,且都位于细胞膜下方,细胞多呈梭行,具有一定的方向性。
培养信息:

培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传5代左右;3代以内状态佳
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔骨骼肌成纤维体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞培养操作:

消化培养法
此方法利用酶(如胰蛋白酶、胶原酶)将组织分散成单个细胞或细胞团,形成细胞悬液进行培养,细胞生长较快。
取材与剪切
同样在无菌条件下获取组织,并用Hanks液清洗干净。
将组织剪切成更小的碎块(约 1 mm3),以便酶更好地发挥作用。
酶消化
将组织块转移至容器中,加入适量的酶消化液(如0.25%胰蛋白酶)。
在 37℃ 条件下消化 20-40分钟,期间可适当摇动或吹打。消化程度需在显微镜下观察,当组织分散成细胞团或单个细胞时,立即终止消化。
终止与洗涤
加入含血清的培养液以终止酶的消化作用(血清可抑制胰蛋白酶活性)。
将细胞悬液通过筛网过滤,除去未消化的组织块。然后以 1000 rpm 离心 5-10分钟,弃去上清液。
接种与培养
用适量新鲜培养液重悬细胞沉淀,进行细胞计数,并调整细胞密度至实验所需浓度(例如 5×10 cells/mL)。
将细胞悬液分装至培养瓶中,放入 37℃、5% CO 培养箱中静置培养。
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获取与培养的挑战:
尽管价值巨大,但原代细胞的研究和应用也面临着显著的挑战:
获取困难:需要从新鲜组织中分离,对取材时间(通常在4-6小时的黄金窗口期内)、无菌操作和组织活性都有极高要求。
培养苛刻:原代细胞非常脆弱,需要特定的、成分复杂的培养基和生长因子,对培养环境(如温度、pH值)极为敏感。
批次差异:由于来源于不同的供体,不同批次的细胞在遗传背景和生理状态上存在固有差异,这给实验的可重复性带来了挑战。
成本高昂:从获取、分离到培养,整个过程耗时、费力且昂贵。
关键字: 兔骨骼肌成纤维细胞;骨骼肌;贴壁;
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