大鼠肺微血管周细胞
细胞简介:

肺微血管内皮细胞构成半选择性屏障,该屏障对于肺气体交换,调节液体和可溶物在血液与肺间质之间的流动具有重要意义。它还具有代谢功能,可以执行一定的非呼吸功能。在肺损伤中,肺微血管内皮细胞是活性氧类的重要靶细胞之一。在肺炎的发生过程中,神经体液介质和氧化剂作用于内皮细胞,使得细胞间隙渗透性增加,蛋白质由血液进入间质。细胞间隙渗透性的增加导致低氧血症,出现呼吸窘迫综合征和非心源性肺水肿。
大鼠肺微血管周细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态
细胞特性:

1)细胞来源于实验动物的正常肺组织。
2)细胞鉴定:血管假性血友病因子(vWF)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。
产品信息:

英文名称 | Rat pulmonary microvascular pericytes | 种属 | 大鼠 |
产品规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | A01X1526 |
组织来源 | 肺组织 | 生长特性 | 贴壁 |
细胞培养操作:

1. 细胞复苏
运输与接收:细胞以液氮冻存形式运输,收到后立即用75%酒精喷洒消毒细胞瓶,置于超净台内无菌操作。
复苏操作:将细胞瓶放入37℃、5% CO培养箱中静置3-4小时稳定状态,显微镜下观察细胞形态和密度,记录初始状态(建议40x、100x、200x各拍一张照片)。
2. 细胞传代
传代时机:当细胞密度达80%汇合度时进行传代。
操作步骤:
弃去旧培养基,用无钙镁PBS润洗细胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶消化液(1-2 mL),37℃孵育1-2分钟,显微镜下观察细胞变圆脱落。
加入5 mL完全培养基终止消化,轻轻吹打使细胞完全脱落。
离心(1000 RPM,5分钟),弃上清,用1-2 mL培养基重悬。
按1:2比例分瓶传代(如T25瓶分至两个T25瓶),补充新鲜培养基至5 mL。
换液频率:每2-3天换液一次。
3. 细胞冻存
冻存液:使用无血清冻存液。
冻存步骤:细胞传代后,用胰蛋白酶消化并离心,重悬于冻存液,缓慢降温至-80℃,最终转入液氮长期保存。
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核心特点:
高度生理相关性:保留了体内来源组织的结构、功能和基因表达特征。
有限寿命:与无限增殖的肿瘤细胞系不同,原代细胞增殖能力有限,经过一定次数的分裂后会进入衰老期,这更符合正常细胞的生理状态。
异质性:初始培养物通常是多种细胞类型的混合物,有时需要通过差速贴壁等方法进行纯化。
操作要求高:对培养环境、试剂质量和无菌操作的要求极为严格,培养难度大于永生化细胞系。
关键字: 大鼠肺微血管周细胞;肺组织;贴壁;
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