小鼠附睾脂肪干细胞永生化细胞专用培养基 新品

小鼠附睾脂肪干细胞永生化细胞专用培养基

商品属性：

产品介绍：

小鼠附睾脂肪干细胞永生化 细胞专用培养基由团队精心优化，经过长期测试，本产品可保持小鼠附睾脂肪干细胞永生化细胞最佳的生长状态。

本产品中已包含小鼠附睾脂肪干细胞永生化 细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于小鼠附睾脂肪干细胞永生化 细胞的培养。

间充质干细胞培养体系     500 ml

产品主要成分

间充质干细胞细胞基础培养基    440 ml

间充质干细胞培养添加剂    5 ml

特级胎牛血清    50 ml

P/S青霉素-链霉素     5 ml

运输和保存

运输：放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输

保存方法：    2℃～8℃，避光，保存2个月；-20℃，避光，保存6个月。
质量控制

实验原理：

以DMEM高糖培养基为基础，添加10%优质胎牛血清、1%双抗及脂肪干细胞生长因子（如bFGF、IGF-1），模拟小鼠附睾脂肪干细胞永生化细胞的脂肪组织微环境。培养基中的营养成分和生长因子可支持细胞增殖并维持其多向分化潜能（如向脂肪细胞、软骨细胞分化），用于小鼠附睾脂肪组织发育、代谢疾病（如肥胖）的研究及药物筛选。
培养基配制：

按产品说明书比例，将基础培养基、胎牛血清、生长添加剂、双抗等成分依次加入无菌容器，轻轻摇晃混合均匀

用0.22μm孔径无菌滤膜对混合培养基进行过滤除菌，转移至无菌培养基瓶，标注配置日期和有效期

配制好的培养基2-8℃避光保存，1个月内使用完毕，避免反复冻融

废弃处理：

未使用培养基：密封后高压灭菌（121℃，20min），按实验室废液处理。

用过的培养基：含细胞碎片或污染物，高压灭菌后丢弃，避免生物污染。
细胞培养步骤：

1. 细胞复苏

冻存管37℃水浴1-2min解冻，转移至超净台消毒，将细胞悬液加入含4ml培养基的离心管。

1000rpm离心3min弃上清，加1-2ml培养基重悬，接种至培养瓶，补液至6-8ml，37℃、5%CO₂培养箱培养过夜，次日换液观察。

2. 细胞传代

细胞密度达80%-90%时，弃旧培养基，用PBS润洗1-2次。

加1ml消化液浸润细胞，37℃消化1-3min，细胞变圆脱落时加2-3ml培养基终止消化，吹打形成单细胞悬液。

1000rpm离心5min弃上清，加1-2ml培养基重悬，按1:2比例接种至新培养瓶，补液至8ml，培养箱培养。

3. 细胞冻存

弃旧培养基，PBS润洗1次，加1ml消化液消化，细胞脱落后加培养基终止，吹打形成悬液转移至离心管。

1000rpm离心5min弃上清，PBS清洗1次，离心后弃液。

加无血清冻存液调整细胞密度至5×10⁶～1×10⁷/ml，分装至冻存管。

程序降温盒中-80℃冷冻24h后，转移至液氮罐长期储存。
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