小鼠结肠黏膜上皮细胞永生化细胞专用培养基 新品

小鼠结肠黏膜上皮细胞永生化细胞专用培养基

商品属性：

产品介绍：

小鼠结肠黏膜上皮细胞永生化细胞专用培养基由团队精心优化，经过长期测试，本产品可保持小鼠结肠黏膜上皮细胞永生化细胞最佳的生长状态。

本产品中已包含小鼠结肠黏膜上皮细胞永生化细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于小鼠结肠黏膜上皮细胞永生化细胞的培养。

上皮细胞培养体系     500 ml

产品主要成分

上皮细胞基础培养基          480 ml

上皮细胞培养添加剂     5 ml

特级胎牛血清           10 ml

P/S青霉素-链霉素         5 ml

运输和保存

运输：放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输

保存方法：    2℃～8℃，避光，保存2个月；-20℃，避光，保存6个月。
质量控制

实验原理：

以DMEM/F12培养基为基础，添加10%优质胎牛血清、1%双抗及结肠黏膜上皮细胞生长因子（如EGF、TGF-α），模拟小鼠结肠黏膜上皮永生化细胞的肠道微环境。培养基中的成分可支持细胞贴壁生长并维持其结肠上皮细胞功能（如肠道屏障、黏液分泌），用于小鼠肠道疾病（如结肠炎、结肠癌）的研究及药物筛选。
细胞培养步骤：

1. 细胞复苏

冻存管37℃水浴1-2min解冻，转移至超净台消毒，将细胞悬液加入含4ml培养基的离心管。

1000rpm离心3min弃上清，加1-2ml培养基重悬，接种至培养瓶，补液至6-8ml，37℃、5%CO₂培养箱培养过夜，次日换液观察。

2. 细胞传代

细胞密度达80%-90%时，弃旧培养基，用PBS润洗1-2次。

加1ml消化液浸润细胞，37℃消化1-3min，细胞变圆脱落时加2-3ml培养基终止消化，吹打形成单细胞悬液。

1000rpm离心5min弃上清，加1-2ml培养基重悬，按1:2比例接种至新培养瓶，补液至8ml，培养箱培养。

3. 细胞冻存

弃旧培养基，PBS润洗1次，加1ml消化液消化，细胞脱落后加培养基终止，吹打形成悬液转移至离心管。

1000rpm离心5min弃上清，PBS清洗1次，离心后弃液。

加无血清冻存液调整细胞密度至5×10⁶～1×10⁷/ml，分装至冻存管。

程序降温盒中-80℃冷冻24h后，转移至液氮罐长期储存。
注意事项：

无菌操作 全程超净台操作，避免交叉污染；培养基出现浑浊、沉淀立即弃用。

温度控制 使用前必须 37℃预热，禁止直接冷培养基培养，避免细胞脱落、凋亡。

消化控制 产品对胰酶敏感，严格控制消化时间（1~3min），过度消化导致细胞损伤。

血清依赖 禁止使用＜10% FBS 培养，劣质血清会导致 AR/PSA 表达丢失、生长停滞。

雄激素实验 若开展雄激素相关实验，需更换为无酚红 RPMI-1640+10% 活性炭处理血清（CD-FBS），避免酚红弱雌激素干扰。

仅限科研 本产品仅用于科研实验，不可用于临床诊断、治疗。
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