中文名：磺化CY5-NHS（磺化花菁5琥珀酰亚胺酯、水溶性CY5活性酯）
英文名：Sulfo-Cyanine5 NHS ester（简称Sulfo-CY5-NHS、Sulfo-Cy5 NHS、Sulfo-Cy5 SE）
CAS号：2230212-27-6（常规钠盐形式）；146368-14-1（N-乙基形式）
分子式：C₃₆H₄₂KN₃O₁₀S₂（钠盐形式）
分子量：779.96
一、分子结构与基础信息
本品属于花菁染料（Cyanine）家族，是CY5近红外荧光染料经磺化修饰并引入N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS ester）的水溶性活性衍生物，核心结构为CY5荧光母核、磺酸基团（-SO₃⁻）与NHS活性酯基团（-CO-NHS），通过柔性连接臂形成稳定共轭体系，兼具优异近红外荧光性能、高水溶性与高反应活性。其磺化修饰赋予分子强负电荷，显著提升水相分散性，有效减少与生物分子的非特异性结合，同时保留NHS活性酯的高反应活性，在ChemicalBook中归类为化学试剂下的荧光染料、生命科学用试剂品类，是水相体系生物分子标记的理想材料，广泛应用于蛋白、抗体、多肽等标记场景[1][4]。
二、物理化学特性
外观为深蓝色固体粉末，对光敏感、易吸潮；水溶性极佳，可直接溶于水、PBS缓冲液等水相体系，也易溶于DMSO、DMF等极性有机溶剂，无需有机助溶剂辅助溶解[1][7]；最大激发波长约646-649nm，最大发射波长约662-672nm，处于近红外区域，组织穿透力强、背景荧光极低，消光系数高达271000 L·mol⁻¹·cm⁻¹，荧光量子产率约0.28，光稳定性优异，在pH 4-10范围内光学性能稳定，可有效规避生物体系自身荧光干扰，适配常规近红外检测设备[1][7]。
三、反应特性与应用
其NHS活性酯基团对氨基具有高度选择性，在弱碱性（pH 7.0-8.5）条件下，可与蛋白质、抗体、多肽及氨基修饰核酸等生物分子的伯氨基（-NH₂）发生亲核取代反应，形成稳定酰胺键，反应条件温和、专一性强，不干扰目标分子生物活性，且不与羟基、硫醇等基团发生非特异性反应[2][6]。因优异的水溶性和生物相容性，无需使用有机共溶剂，可避免有机溶剂对生物样品的损伤，主要应用于水相体系中的蛋白/核酸荧光标记、抗体偶联、活细胞示踪、免疫荧光染色、荧光原位杂交、流式细胞术、生物传感等科研场景，可与其他荧光染料联用实现多通道检测[3][5]。
四、质量与使用提示
科研级纯度≥95%（HPLC检测），部分高纯级可达98%，干燥失重≤1.0%，无蛋白酶、核酸酶等杂质[1][8]；短期可2-8℃干燥避光保存，长期建议-20℃避光、干燥密封保存，保质期可达24个月，避免反复冻融，室温运输不超过3周[7][11]；NHS活性酯基团对湿度敏感，水溶液易水解，建议现配现用，若用DMSO配制母液，可在-20℃避光保存2周[11]；使用前需将产品置于室温回温至少20分钟，标记反应需使用不含氨基的缓冲体系（如PBS、HEPES缓冲液），避免使用Tris、甘氨酸等含伯胺、仲胺的缓冲液及高浓度咪唑，以防影响反应效率[1][8]；操作时需避光防潮，佩戴防护装备，避免接触皮肤与黏膜，标记反应全程避光，防止荧光光漂白[8][11]；反应后可通过透析、凝胶过滤或HPLC去除未反应的活性酯及副产物，优化标记效果；本品仅限科研使用，禁止用于临床诊断、治疗及其他非科研用途。