中文名：异硫氰酸荧光素标记链霉亲和素（荧光素-链霉亲和素）
英文名：Fluorescein Isothiocyanate-Streptavidin（简称FITC-Streptavidin、FITC-SA）
CAS号：65981-62-4
分子式：因链霉亲和素（四聚体蛋白）与FITC标记比例不同存在差异，无固定单一分子式
分子量：约52-60kDa（链霉亲和素单体约13kDa，四聚体约52kDa，FITC标记后分子量略有提升）
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一、分子结构与基础信息
本品是由异硫氰酸荧光素（FITC）与链霉亲和素（Streptavidin，SA）通过共价键偶联形成的荧光标记蛋白衍生物，核心结构由两部分组成：链霉亲和素的四聚体蛋白骨架与FITC荧光发色团。链霉亲和素是从放线菌提取得到的非糖基化四聚体蛋白，每个四聚体可高特异性结合4个生物素分子，结合常数极高，是生物体系中已知最强的非共价相互作用之一。FITC通过自身异硫氰酸酯基团与链霉亲和素分子中赖氨酸残基的伯氨基发生共价反应，形成稳定的硫脲键，实现荧光标记。其分子结构兼具链霉亲和素对生物素的高亲和力与FITC的荧光可视化特性，在保持链霉亲和素生物活性的同时，赋予其荧光检测能力，在ChemicalBook中归类为化学试剂下的荧光染料、生命科学用试剂、荧光探针品类，是生物医学科研中生物素化体系检测的常用工具。
二、物理化学特性
外观为淡黄色至橙色固体粉末，多为无盐冻干品，对光敏感、易吸潮；水溶性优异，可直接溶于水、PBS缓冲液、HEPES缓冲液等水相体系，也可溶于甲醇、DMSO等极性有机溶剂，溶解后形成均匀透明溶液，无明显沉淀；荧光特性稳定，最大激发波长约490-495nm，最大发射波长约516-525nm，发射明亮的绿色荧光，荧光量子产率高，信号强度稳定，适配荧光显微镜、流式细胞仪、酶标仪等常规检测设备；FITC与链霉亲和素的标记比例常规为3-9mol FITC per mol链霉亲和素，标记牢固不易脱落；在中性至弱碱性环境中光学性能最稳定，推荐使用pH 7.0-8.5范围，酸性环境会导致荧光强度减弱，强酸强碱或高温会导致蛋白变性、荧光淬灭；特异性活性≥5 units/mg protein，一个单位可结合1μg生物素。
三、反应特性与应用
本品核心反应特性源于链霉亲和素对生物素的高特异性和高亲和力，无需复杂反应条件，可在生理温度和中性缓冲液体系中快速与生物素化分子结合，结合反应不可逆，且不影响目标分子的生物活性。其荧光特性可实现结合过程的可视化与定量检测，四聚体结构可同时结合多个生物素化配体，实现信号放大。主要应用于免疫荧光标记、流式细胞术分析、核酸杂交实验、ELISA与固相检测系统、蛋白互作与定位分析等科研场景；可作为第二抗体替代物，识别生物素化一抗或探针，应用于免疫组化、细胞染色和组织切片成像；可用于检测生物素化蛋白、核酸或小分子，追踪生物素化药物或纳米颗粒的靶向递送过程，还可用于生物材料表面荧光修饰，构建高灵敏度生物传感平台。
四、质量与使用提示
科研级纯度≥95%，无蛋白酶、核酸酶等杂质，无游离FITC残留，为基本无盐冻干粉末；短期可4℃避光干燥保存，长期建议-20℃避光、干燥密封保存，冻干固态形式可稳定保存12-24个月，建议分装成小份存放，避免反复冻融；室温运输不超过3周，需采用冰袋冷藏，防止高温导致蛋白变性和荧光衰减；对光敏感，储存、操作及实验全程需避光，防止荧光淬灭，可添加抗淬灭剂提升荧光稳定性；水溶液建议现配现用，溶解后可在4℃避光保存3-7天，若用DMSO配制母液，-20℃避光可保存1个月以上；使用前应根据实验平台调整至合适浓度，避免浓度过高导致非特异性结合或荧光自淬灭，实验中可添加适当封闭剂以减少背景干扰；使用时需选择中性或弱碱性缓冲液，避免使用含伯胺的缓冲液，以防影响结合活性；操作时需在通风橱内进行，佩戴防护装备，避免接触皮肤与黏膜，从冰箱取出后需回温至室温再开盖，防止受潮；本品仅限科研使用，禁止用于临床诊断、治疗及其他非科研用途。