人角膜成纤维细胞 新品

人角膜成纤维细胞是构成角膜基质层的主要细胞，参与角膜的结构维持、损伤修复和瘢痕形成。细胞呈成纤维细胞样形态，表达Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α-SMA标志物，可分泌细胞外基质维持角膜的透明性和曲率。其异常活化与角膜瘢痕、角膜炎、角膜营养不良等疾病相关，常用于研究角膜生理病理、损伤修复机制及眼科疾病药物研发。
产品名称 人角膜成纤维细胞

英文名称：Human Corneal Fibroblast Cells

货号：YS-01X7415

组织来源 眼角膜组织

种属 人

产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介：实验室分离的人角膜成纤维细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的人角膜成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液：0.25%胰蛋白酶人角膜成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

人角膜成纤维细胞分离自眼角膜组织；角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神经末梢，如有外物接触角膜，眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明，角膜并没有血管，透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的角膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。角膜成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括：构造和维持角膜的正常形态，合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。

细胞组成：角膜基质层成纤维细胞（角膜基质细胞静息态）

形态结构：细长梭形，胞体纤细，排列规整，胞质均匀

分子标记：Vimentin、Collagen Ⅰ/Ⅴ、ALDH3A1

功能特性：合成角膜基质胶原，维持角膜透明度与力学结构，参与角膜创伤修复与瘢痕形成

合成角膜胶原纤维，维持角膜透明度与机械强度

参与角膜外伤、术后损伤修复与基质重塑

调控角膜局部炎症，缓解外源刺激造成的损伤

平衡角膜基质代谢，预防角膜浑浊、瘢痕增生

1.选取新鲜组织，70%乙醇消毒后无菌条件下取出颅盖骨，去除血管及结缔组织，剪成1×1mm的小块

2.加入2ml 0.25%胰蛋白酶，37℃水浴消化30min，离心去酶，弃上清

3.加入2ml Ⅱ型胶原酶，37℃水浴继续消化1h，期间每隔15分钟轻轻摇晃一次

4.消化结束后加入预热的完全培养基终止消化，用200目滤网过滤，滤液1500×g离心5分钟

5.弃上清，用预热的完全培养基重悬细胞沉淀，接种至提前包被好的培养瓶

6.将培养瓶置于37℃、5%CO₂培养箱中培养