人色氨酰tRNA合成酶2(WARS2)重组蛋白开展线粒体翻译过程调控、氨基酸装载酶活性测定、线粒体功能缺陷相关遗传病体外机制研究实验。
型号：YS-DB2504
产品名称：人色氨酰tRNA合成酶2(WARS2)重组蛋白
物种：Homo sapiens (Human，人)
英文名称：Recombinant Tryptophanyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (WARS2)
TrpRS; Tryptophan tRNA Ligase 2,Mitochondrial; Tryptophanyl-tRNA synthetase
酶与激酶
物种：Homo sapiens (Human，人)
来源：原核表达
宿主E.coli
内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位：：n/a
预测分子量：43.8kDa
实际分子量：-(差异分析请参阅说明书)
片段与标签：Met1~Leu360 with
缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）
性状：冻干粉
纯度：> 90%
等电点：-
应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：
氨基酸氨酰化催化机制：WARS2 催化色氨酸、ATP、tRNA^Trp 三步反应，生成色氨酰 - tRNA^Trp，为线粒体翻译核心酶。
焦磷酸耦联显色定量检测：反应释放焦磷酸，耦联酶体系显色定量焦磷酸生成量，换算氨酰化活性。
琼脂糖凝胶电泳 tRNA 氨基酰化验证：酸性电泳区分带电氨基酰化 tRNA 与空载 tRNA，判定 WARS2 活性。
双底物缺失阴性对照：缺少色氨酸或对应 tRNA 时无产物生成，证明催化由 WARS2 特异性介导。
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复溶操作要点：
复溶前准备
工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。
缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：
基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl
保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子
复溶步骤
短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。
缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。
温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。
静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。
关键字： 人色氨酰tRNA合成酶2;WARS2;重组蛋白;
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