人丝裂原激活蛋白激酶10(MAPK10)重组蛋白用于 JNK3 激酶活性检测、神经细胞凋亡、应激应答及神经退行性疾病体外通路验证实验。
型号:YS-DB2084
产品名称:人丝裂原激活蛋白激酶10(MAPK10)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Mitogen Activated Protein Kinase 10 (MAPK10)
JNK3; SAPK1b; PRKM10; Stress-activated protein kinase 1b; Stress-activated protein kinase JNK3; c-Jun N-terminal kinase 3; MAP kinase p49 3F12
酶与激酶
感染免疫
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::Cytoplasm. Membrane; Lipid-anchor. Nucleus. Mitochondrio
预测分子量:31.9kDa
实际分子量:-(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Arg88~Ala332 with
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:9.3
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

下游靶蛋白丝苏氨酸磷酸化催化:活化 MAPK10 消耗 ATP,磷酸化转录因子、多肽底物特定丝氨酸 / 苏氨酸位点。
³²P 放射性同位素掺入法定量激酶活:放射性磷酸基团整合至底物,沉淀计数量化磷酸转移效率。
免疫印迹重组蛋白鉴定:MAPK10 特异性抗体验证蛋白表达完整、分子量正确。
上游激活激酶依赖性验证:MAPK10 需要上游激酶磷酸化激活,未活化蛋白无催化活性,匹配 MAPK 通路调控特征。
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常见实验场景操作指南:

细胞培养实验
浓度优化:先设置预实验梯度(如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况,确定最优工作浓度。
添加时机:细胞接种后24-48小时,待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。
更换培养基:若蛋白半衰期较短,需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。
免疫检测实验
阳性对照设置:在ELISA或WB实验中,用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线,确保定量准确性。
封闭处理:若蛋白用于包被ELISA板,包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭,降低非特异性结合。
抗体配对:选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体,避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。
蛋白相互作用实验
标签选择:若使用Pull-down实验,优先选择GST或His标签的重组蛋白,便于亲和层析分离。
反应条件:在生理缓冲液(如PBS)中进行,温度控制在4℃,避免蛋白变性。
阴性对照:设置不含目标蛋白的对照组,排除标签非特异性结合的干扰。
关键字: 人丝裂原激活蛋白激酶10;MAPK10;重组蛋白;
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