大鼠FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA试剂盒

双抗体夹心酶联免疫吸附试验，酶标板包被抗 Flt3 捕获抗体，样本造血生长因子受体 Flt3 结合固相载体，HRP 标记检测抗体结合抗原，洗涤显色后标准曲线定量 Flt3 蛋白。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测限0.06ng/mL，精准检测大鼠Flt3微量表达水平

检测范围：0.1ng/mL - 85ng/mL，适配大鼠造血、肿瘤相关样本检测

反应时间：总反应时长130分钟，样本孵育70分钟，酶孵育30分钟，显色15分钟，终止5分钟

保存条件：2 - 8℃避光冷藏保存，核心抗体试剂禁止冷冻

有效期：原装试剂盒有效期6个月，合规储存无活性衰减

显色系统：高灵敏TMB显色体系，低浓度检测辨识度高

检测波长：450nm检测，570nm校正背景

标准曲线绘制：7点梯度标准浓度，四参数拟合，R²≥0.996

特异性：特异性结合大鼠Flt3蛋白，与其他酪氨酸激酶无交叉反应

重复性：板内CV≤5%，板间CV≤7%，重复性良好

注意事项：细胞样本需充分裂解离心；试剂避免交叉污染；显色时间严格把控，避免过显色影响OD值准确性
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

试剂平衡：试剂盒室温静置 27min，浓缩洗涤液稀释 20 倍，骨髓细胞上清室温平衡。

标准品稀释：Flt3 标准品稀释配制 6 梯度标准液，空白对照孔。

加样孵育：各孔 50μL 标准品、样本，酶结合物 50μL，37℃避光孵育 62min。

洗板操作：洗涤液浸泡 33s，拍干残液，洗板 5 次。

底物显色：底物 A、B 各 50μL，避光孵育 16min。

终止读数：终止液混匀，9min 内读取 450nm 吸光值。

数据计算：标准曲线定量 Flt3，检测造血干细胞受体蛋白。