大鼠钙/钙调素依赖性蛋白激酶2(CAMK 2)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理，预先在酶标板包被大鼠CAMK2特异性单克隆抗体，加入梯度标准品和待测大鼠细胞、组织样本，样本中的CAMK2抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除非特异性杂质，加入辣根过氧化物酶标记的CAMK2检测抗体，形成免疫复合物，洗涤后底物显色，终止后检测吸光度，依据标准曲线精准定量样本中CAMK2的表达量。
基本参数‌：

产品名称：大鼠钙/钙调素依赖性蛋白激酶2(CAMK 2)ELISA试剂盒

英文名称：CAMK 2 ELISA Kit
货号：Y-E1111

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度0.07ng/mL，可精准检测大鼠脑组织、心肌组织中微量CAMK 2

检测范围：0.1ng/mL～10ng/mL，覆盖大鼠神经、心肌损伤模型CAMK 2表达区间

反应时间：总实验时长115分钟，抗体孵育85分钟，显色反应30分钟

保存条件：2～8℃避光冷藏保存，酶结合物单独密封存放，避免失活

有效期：未拆封有效期6个月，开封后25天内用完试剂

显色系统：优化TMB显色体系，反应灵敏，微量蛋白可清晰显色

检测波长：450nm标准检测波长，600nm校正波长

标准曲线绘制：6梯度标准浓度，四参数逻辑拟合，R²≥0.995，线性关系稳定

特异性：特异性结合大鼠CAMK 2蛋白，与CAMK1、CAMK4等同家族激酶无交叉反应

重复性：板内CV≤4%，板间CV≤6%，检测数据稳定可靠

注意事项：组织样本需充分裂解、离心取上清，避免杂质干扰；实验全程低温避光，防止蛋白降解；孵育温度严格37℃恒定；终止后立即上机读数，避免数值波动。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒提前 30min 室温复温，洗涤液 1:23 稀释，大鼠脑组织裂解上清全程低温操作。

酶标板每孔添加 100μL CAMK2 重组标准蛋白、脑上清、空白稀释液。

酶标捕获抗体 100μL / 孔，覆膜 37℃孵育 77min。

洗涤浸泡 34s，洗 4 次，拍干微孔水分。

避光显色液 100μL，37℃显色 17min。

滴加终止液充分混匀微孔液体。

酶标仪 450nm 测吸光度，定量 CAMK2 激酶表达量。
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