本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法原理，酶标板预先包被大鼠血栓前体蛋白(TpP)特异性单克隆抗体，待测样本中的TpP与包被抗体特异性结合，随后加入辣根过氧化物酶标记的TpP抗体形成免疫复合物，经洗涤去除游离组分后加入显色底物发生酶促显色反应，终止反应后通过酶标仪检测吸光度值，样本吸光度与TpP浓度成正比，依据标准曲线可精准定量大鼠样本中TpP含量。
基本参数：
产品名称：大鼠血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒
英文名称：TpP ELISA Kit
货号：Y-E1396
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测浓度0.05ng/mL
检测范围：0.1ng/mL - 20ng/mL
反应时间：总反应时长100分钟
保存条件：试剂盒组件2-8℃保存，标准品分装后-20℃冷冻保存
有效期：未开封整机6个月，分装标准品3个月
特异性：仅特异性结合大鼠TpP，与凝血相关同源蛋白无交叉结合
重复性：板内变异系数≤5%，板间变异系数≤7%
注意事项：血清样本需新鲜制备，避免反复冻融，洗涤液需充分洗涤去除残留杂质
关键注意事项：
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）
避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果
显色过程需避光，避免阳光直射影响结果
实验步骤如下：
提前 25min 取出试剂盒放置室温回温，按说明书比例浓缩洗涤液用纯水稀释配制成工作洗涤液，梯度稀释 TpP 标准品。
酶标板固定于板架，标记空白、标品、样本孔；标品孔加梯度 TpP 标准液，样本孔加入预处理大鼠待测血浆样本，空白孔加稀释缓冲液，每孔同步加入酶标记结合液，覆膜封板。
37℃恒温环境避光孵育 55min，保证反应体系稳定结合抗原抗体复合物。
揭除封板膜，倾倒孔内废液，每孔注满洗涤液静置 25s 后倒扣甩净，连续洗板 4 次，吸水纸彻底拍干微孔。
依次向各微孔添加显色液 A 与显色液 B，低速震荡混匀，37℃遮光条件下显色 12min。
每孔滴加终止液终止显色反应，水平轻摇酶标板使溶液充分混合。
酶标仪设置 450nm 检测波长，读取各孔 OD 值，依托标准曲线换算样本 TpP 浓度。
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