本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔内固定大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)特异性抗体，加入待测样本后，样本中的靶抗原与包被抗体特异性结合，再结合酶标记配对抗体形成免疫夹心结构，洗涤去除未结合物质后进行底物显色，显色强度与GP-ⅡbⅢa含量正相关，通过标准曲线可精准定量大鼠样本中靶抗原含量。
基本参数：
产品名称：大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA试剂盒
英文名称：GP-ⅡbⅢa ELISA
货号：Y-E1211
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测浓度0.09ng/mL
检测范围：0.25ng/mL - 50ng/mL
反应时间：总反应时长105分钟
保存条件：2-8℃冷藏保存，板条密封防潮存放
有效期：未开封6个月，板条开封后1周内用完
特异性：特异性识别大鼠GP-ⅡbⅢa复合蛋白，无其他膜糖蛋白交叉反应
重复性：板内变异系数≤5.5%，板间变异系数≤7.5%
注意事项：血小板样本需轻柔处理，避免机械破损导致蛋白流失
通用注意事项：
样本要求
血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。
温度控制
孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。
避光操作
TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。
洗板规范
洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。
污染防控
实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。
安全防护
终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。
失效判定
试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。
稀释校正
样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。
空白对照
空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。
储存禁忌
试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：
试剂盒室温回温 28min，配制洗涤工作液，梯度制备 GP-ⅡbⅢa 标准品，待测抗凝血浆样本预处理。
标记酶标板孔型，空白孔加稀释液，标准孔加梯度标品，样本孔加待测样本，每孔加入一步法酶标记物，密封封板。
37℃避光孵育 65min，保证抗原抗体充分结合。
弃去孔内废液，洗涤液浸泡微孔 35s，甩净洗液，洗板 5 次，吸水纸拍干微孔。
加入显色底物 A、B 液，震荡混匀，37℃避光显色 16min。
滴加终止液终止反应，混匀板面溶液。
450nm 波长读取 OD 值，计算样本 GP-ⅡbⅢa 浓度。
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