本试剂盒采用间接ELISA检测原理，将纯化的异质型核糖核蛋白复合物（hnRNP/RA33）抗原包被于酶标板微孔表面。检测时，样本中的抗hnRNP/RA33抗体可与固相抗原发生特异性结合，洗涤去除未结合的非特异性成分后，加入辣根过氧化物酶标记的抗人免疫球蛋白二抗，与样本特异性抗体结合。经洗涤纯化反应体系后，加入TMB底物启动显色反应，显色强度与样本中抗RA33抗体含量呈正相关，终止反应后检测吸光度，对照标准曲线即可完成样本中目标抗体的定量检测。
基本参数：
产品名称：异质型核糖核蛋白复合物/抗RA33抗体(hnRNP/RA33)ELISA试剂盒
英文名称：hnRNP/RA33 Elisa Kit
货号：Y-E447
规格：48T/96T
灵敏度：最低检出 0.8RU/mL
检测范围：1.6RU/mL～200RU/mL
反应时间：37℃封闭后加样孵育 120min，二抗孵育 70min，避光显色 30min，终止读板，总时长 220min
保存条件：试剂盒 2～8℃避光存放；显色液单独避光冷藏，不可与强酸试剂混放
显色系统：改良型 TMB 显色底物，硫酸终止液终止反应
检测波长：450nm，参比 630nm
标准曲线绘制：采用五点定标法绘制标准曲线，取复孔平均值剔除离散值
注意事项：类风湿相关样本建议新鲜检测；洗板步骤不能省略，否则非特异吸附会造成假阳性结果。
关键注意事项：
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）
避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果
显色过程需避光，避免阳光直射影响结果
实验步骤如下：
试剂盒室温回温 30min，稀释浓缩洗涤液，配置 RA33 抗体阳性标准品梯度液。
酶标板依次加入标准品、待测血浆样本、阴阳对照样本，做好孔位标记。
一步法加入酶标记抗体工作液，密封封板，37℃恒温孵育 60min。
去封板膜，甩干液体，连续洗板 5 次，每次浸泡 28s，吸水纸吸干残留洗液。
加入显色底物 A、B 混合液，避光室温显色 15min。
加入终止液终止显色反应，水平摇晃酶标板混匀。
双波长检测 OD 值，绘制标准曲线，定量抗 RA33 抗体水平。
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