本试剂盒依托双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔内包被有小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白6（IGFBP-6）特异性抗体。检测过程中，样本与标准品中的IGFBP-6抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除非特异性结合组分后，加入辣根过氧化物酶标记的配对检测抗体，构建稳定的免疫夹心复合物。后续加入TMB底物进行酶促显色，显色深浅与样本中IGFBP-6含量呈正相关，终止反应后检测吸光度，对照标准曲线即可完成样本中目标蛋白的定量检测。
基本参数：
产品名称：小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)ELISA试剂盒
英文名称：IGFBP-6 ELISA Kit
货号：Y-E2072
规格：48T/96T
灵敏度：检出下限 0.05ng/mL
检测范围：0.11ng/mL～33ng/mL
反应时间：37℃样本孵育 76min，二抗 45min，底物显色 17min，终止读板，总时长 138min
保存条件：试剂盒 2～8℃冷藏，禁止冻存任意组分；工作稀释液现配现用
显色系统：HRP 介导单组份 TMB 显色
检测波长：450nm
标准曲线绘制：四参数 Logistic 回归构建标准曲线，复孔偏差＞12% 需重测
注意事项：血浆样本添加抗凝剂不可选用肝素，会干扰抗原抗体结合。
关键注意事项：
本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。
终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。
终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：
试剂盒室温放置 35min 回温，稀释洗涤液，配制 IGFBP-6 系列标准稀释液。
酶标板布设标准梯度孔、待测血清样本孔、空白对照孔，规范加样。
一步加入酶标记检测液，密封封板，37℃避光孵育 73min。
弃液洗板 5 次，浸泡 30s 每轮，吸水纸拍干微孔。
避光显色 17min。
滴加终止液终止显色，摇晃酶标板混匀。
依据标准曲线方程计算样本 IGFBP-6 浓度。
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