小鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/H-2Ⅰ)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，酶标板微孔包被有小鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类（MHCⅠ/H-2Ⅰ）特异性捕获抗体。检测过程中，样本与标准品中的MHCⅠ抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除游离杂质成分后，加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体，形成稳定的免疫夹心结构。充分洗涤后加入TMB底物显色，酶促反应显色深浅与样本中MHCⅠ含量正相关，终止反应后检测吸光度，依据标准曲线可精准测定样本中目标抗原的含量。
基本参数‌：

产品名称：小鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/H-2Ⅰ)ELISA试剂盒

英文名称：MHCⅠ/H-2Ⅰ ELISA Kit
货号：Y-E2474

规格：48T/96T

灵敏度：检出限 0.14ng/mL

检测范围：0.28ng/mL～27ng/mL

反应时间：室温孵育 84min，二抗 47min，底物显色 16min，终止检测，合计 147min

保存条件：试剂盒 2～8℃；微孔板开封后密封加干燥剂，防止包被位点失活

显色系统：单组份稳定 TMB 显色液

检测波长：450nm

标准曲线绘制：倍比稀释标准品，非线性回归拟合标准曲线

注意事项：淋巴细胞样本新鲜制备；操作环境避免灰尘落入微孔孔内。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒室温回温 24min，稀释洗涤液，倍比稀释 H-2Ⅰ 标准蛋白品。

酶标板加入标准品、小鼠细胞悬液上清样本、空白稀释液。

一步添加酶偶联检测抗体，封板避光 37℃孵育 69min。

洗板 6 次，每次浸泡 34s，彻底拍干微孔内液体。

显色混合液遮光显色 18min。

终止液终止显色反应，混匀反应体系。

酶标仪读板，计算 MHCⅠ 分子表达水平。
公司正在出售的产品：